苦杏仁苷

【背景及概况】^[1][2]

苦杏仁是山杏（prunus armeniaca ansu）的成熟种子，其中存在一种含有氰基（-CN）的甙类—苦杏仁甙，苦杏仁甙在苦杏仁中含量比甜杏仁高20～30倍。在消化道内经酶和酸的作用释放出氢氰酸并被粘膜吸收进入血液后引起的一系列毒性反应。氢氰酸为原浆毒，氰离子可与细胞色素氧化酶中的铁结合，致使呼吸酶失活，组织细胞利用氧出现障碍，组织缺氧而陷入窒息状态。氢氰酸还可直接损害延髓的呼吸中枢和血管运动中枢。苦杏仁甙为剧毒，对人的最小致死量为0.4～1mg/kg体重，约相当于1～3粒苦杏仁。中毒潜伏期为1～2小时，主要症状为口苦、流涎、恶心、呕吐、心悸和程度不同的呼吸困难，严重者可在几小时或更短时间内窒息死亡。食后1～2h出现症状：口苦涩、流涎、头晕、头痛、恶心、呕吐、心悸、脉速及四肢软弱无力。重症者，感到胸闷，并出现不同程度的呼吸困难。严重者有意识丧失、昏迷、四肢冰冷、瞳孔放大，对光反射消失，牙关紧闭、全身阵发性痉挛。最后因呼吸麻痹和细胞窒息而死亡中毒的处理除对症外，应尽快使用特效解毒剂，可用亚硝酸异戊酯、亚硝酸钠和硫代硫酸钠综合疗法解毒。应加强卫生宣教，切勿食用苦杏仁。杏仁在加工过程中应经加热水解形成氢氰酸挥发除尽后方可安全食用。

此外，苦杏仁苷是常见的氰苷类物质，也是传统中药苦杏仁中的有效成分，是α-羟基腈的衍生物，迄今已成为医药上常用的祛痰止咳剂、辅助性抗癌药物。苦杏仁苷广泛存在于枇杷、杏、桃、青梅、杨梅等植物的种仁中。

【结构与特性】^[2]

苦杏仁苷由两分子的葡萄糖和一分子的杏仁腈联结而成，分子式为C₂₀H₂₇O₁₁N，其分子结构如下：

苦杏仁苷的三水合物为斜方柱状结晶（水），熔点200℃，无水物熔点约220℃，1g可溶于12m L水、900m L乙醇或11m L沸乙醇中，易溶于沸水，几乎不溶于乙醚。

【生产工艺】^[3]

1. 水提法

以杏仁为原料，提取工艺为：提取时间 20 min、固液比 1:10、浸泡时间 30min、提取 2 次，此法苦杏仁苷提取得率接近 3.2%。以生桃仁为原料，采用热水直接提取，提取物中苦杏仁苷含量是冷水先浸后提的 2 倍，用水、提取时间及提取次数对苦杏仁苷提取率无显著影响，提示生桃仁中苦杏仁苷较宜采用热水直接提取。以杏仁为原料，比较蒸馏苦杏仁水法、回流煎煮法及醇提法对苦杏仁苷提取率的影响，结果显示采用蒸馏苦杏仁水法时苦杏仁苷提取率 95.77% ，明显高于回流煎煮法55.61%和醇提苦杏仁苷法64.88%。

2. 醇提法

以杏花花粉为原料，用无水乙醇以固液比 1:7，超声 20 min，提取 12 h，此法苦杏仁苷提取率 6.1%。以苦杏仁为原料，利用苦杏仁苷易溶于热乙醇，微溶于冷乙醇的性质提取苦杏仁苷，结果显示，加 6倍 95% 乙醇提取 1h，共 2 次，得苦杏仁苷粗品，粗品用无水乙醇以固液比为1:30 重结晶 3 次进行纯化，此法苦杏仁苷提取率 92.47%，转移率 45.92% 。

3. 大孔吸附树脂分离纯化法

以苦杏仁为原料，用大孔吸附树脂分离纯化苦杏仁苷，结果显示，大孔树脂LSA-30 较适合吸附和分离苦杏仁苷，其饱和吸附量为 55.52%；吸附条件为：室温提取液 pH 6～9、吸附流速 1～2 mL/min； 洗脱条件为： 40 ℃ 、洗脱液 60% 乙醇（pH6或 pH8）、洗脱流速1～2 m L/min，此法苦杏仁苷纯度 93.6%。以枇杷核为原料，筛选一种吸附性能较好的大孔吸附树脂，并分离纯化苦杏仁苷，结果显示，大孔吸附树脂 HZ801 较适合吸附和分离苦杏仁苷，吸附条件为：上柱液浓度 1.0～1.5g/L、上柱流速 2BV/h，吸附量11.5g/L、吸附率 89.8%；洗脱条件为：洗脱液乙醇浓度为40%、洗脱流速为2 BV/h，洗脱液用量 2.5 BV、洗脱率 99.7% 。

4. 超声波提取法

以山杏仁为原料，研究固液比、乙醇浓度、提取温度、提取时间及超声功率对苦杏仁苷提取效果的影响，结果显示，单因素工艺为：固液比 1:5、乙醇浓度80% 、提取温度 70℃、提取时间 40 min、超声功率 64 W。

5. 微波提取法

以苦杏仁为原料，以无水乙醇为溶剂，采用微波辅助法提取苦杏仁苷。结果显示，当微波功率 500 W时，提取工艺为： 固液比 1： 6、提取温度 75℃ 、提取 2次、每次 15 min，此法苦杏仁苷的提取率 4.08%

【药理作用及应用】^[4]

1. 苦杏仁苷对心血管的作用

采用载脂蛋白 E 敲除法建立自发性动脉粥样硬化小鼠模型，苦杏仁苷组腹腔注射给药1mg/ kg·d ，连续 4 周。结果显示，苦杏仁苷能降低实验小鼠的血清总胆固醇、血清三酰甘油和低密度脂蛋白胆固醇，可有效诱导 Foxp3 阳性的调节性 T 细胞，增强巨噬细胞的吞噬作用，促进斑块部位细胞的凋亡，进而减少斑块面积和斑块覆盖率，提高有效管腔面积，抑制管腔代偿性增大，提示苦杏仁苷具有一定的抗动脉粥样硬化。

2. 苦杏仁苷对消化系统的作用

1）抗胃溃疡：通过建立小鼠束缚-冷冻应激性胃溃疡模型、大鼠醋酸烧灼溃疡模型、大鼠幽门结扎胃溃疡模型，以观察苦杏仁苷对实验性胃溃疡的影响，

结果表明，苦杏仁苷灌胃给药 20、40 mg/kg 组可抑制小鼠束缚-冷冻应激性胃溃疡；5、10、20 mg /kg 组均可促进大鼠醋酸烧灼溃疡愈合；10、20 mg /kg 组可减少幽门结扎所致胃溃疡的溃疡面积，提示苦杏仁苷具有较好的抗溃疡作用。

肝纤维化：采用气管暴露法建立大鼠博莱霉素肺纤维化模型，腹腔注射给药苦杏仁苷 15 mg/kg，探讨其对博莱霉素大鼠肺纤维化I、III型胶原表达的影响。建模的第 7 天、第 14 天和第 28 天，苦杏仁苷组大鼠III型胶原面积百分比均低于博莱霉素组，第 28 天时苦杏仁苷组大鼠肺组织I型胶原面积百分比降低。说明苦杏仁苷可抑制I、III型胶原形成，从而有效减缓实验大鼠肺纤维化的进程，提示该药将有可能用于人类肺纤维化的防治。

3. 苦杏仁苷对泌尿系统的作用

采用单侧输尿管梗阻法建立大鼠肾脏间质纤维化模型，苦杏仁苷组灌胃给药3、5 mg /d，于术后 7、14、21 d 处死动物，观察各组大鼠肾脏病理损害程度。结果显示苦杏仁苷组在 21 d 时大鼠肾脏纤维化程度明显低于单侧输尿管梗阻组，其中3 mg /d治疗组降低了 35%，5 mg /d 治疗组降低了 28% 。表明苦杏仁苷能明显减轻肾脏病理损害的程度，延缓肾间质纤维化的进程，进一步证明苦杏仁苷具有抗纤维化作用；

4. 苦杏仁苷对免疫系统的作用

 1）免疫调节采用皮下注射 Freund 完全佐剂抗原，建立慢性免疫萎缩性胃炎大鼠模型； 采用足跖皮内注射 Freund 完全佐剂，造成大鼠佐剂性关节炎； 采用碳粒廓清实验，测定小鼠廓清指数(K) 及吞噬指数(A) ，观察苦杏仁苷对大鼠佐剂性炎症和小鼠碳粒廓清的影响，以揭示其免疫调节作用。结果显示连续 6周灌胃给药苦杏仁苷 20 mg/kg，对大鼠慢性免疫萎缩性胃炎效果，各剂量组胃液总酸度降低、胃蛋白酶活性升高；浓度为 10、20 mg /kg、连续 1 周时，能显著抑制大鼠致炎后的足跖肿胀度；浓度为 40 mg /kg、连续 1 周时，可以显著提高实验的 K 和 A。

 2）免疫抑制

在的肾移植大鼠实验中，发现腹腔注射苦杏仁苷 10 mg /kg（隔天 1 次）、环孢素 8 mg /kg（每天 1 次）的联合用药效果优于单用环孢素，更能延长肾移植大鼠的存活时间，推测苦杏仁苷可通过直接抑制肾移植大鼠的免疫细胞的增殖，发挥免疫抑制作用，但其具体作用机制仍需深入研究。

5. 苦杏仁苷抗抗肿瘤作用

将 1.25～10g/L 的苦杏仁苷作用于膀胱癌细胞（UMUC-3、RT112、TCCSUP）每周 3 次，连续 2 周后发现苦杏仁苷剂量依赖性地抑制肿瘤细胞生长繁殖，使其停滞于 G0/ G1期，且 10 g /L 时效果。 10 g /L 剂量的苦杏仁苷作用下，UMUC-3 和ＲT112 的附着、迁徙能力均明显下降，但 TCCSUP 的迁徙能力却增加，提示苦杏仁苷能够调节整联蛋白β1或 β4，从而影响膀胱癌细胞的附着和迁徙，其效果与细胞类型有关。

6. 苦杏仁苷对呼吸系统的作用

1）止咳作用：利用酶消化法稳定获得支气管平滑肌细胞BSMC ，在含 10% 胎牛血清的 DMEM-F12 培养基中进行传代培养，以不同浓度的苦杏仁苷处理，24 h后细胞开始出现抑制，在 0.022～0.704 g /L 范围内呈浓度依赖性，浓度为 0.704 mmol/L 时抑制率最强，可达 50% 。

2）平喘作用：通过乙酰胆碱和磷酸组胺致豚鼠哮喘模型、卵白蛋白致豚鼠哮喘模型来比较苦杏仁、桔梗及二者配伍的平喘作用，结果显示苦杏仁、桔梗及二者配伍均能显著延长乙酰胆碱和磷酸组胺致豚鼠哮喘的潜伏期，明显减少卵白蛋白致豚鼠哮喘模型的炎症细胞数量，抑制舒缩性介质和炎性因子水平的升高，二者配伍比例为 1∶2。

3）预防支气管肺发育不良：建立原代培养早产鼠 AECII高氧细胞模型，以探讨苦杏仁苷对高氧暴露早产鼠肺泡II型AECII)细胞增殖及表面活性物质蛋白(SP) mRNA表达的影响。结果显示，苦杏仁苷 50～200 mol/L 时以剂量依赖方式促进早产鼠 AECⅡ细胞增殖，当浓度为 200 mol/L 时，其作用最强，400 mol/L 时反而呈抑制作用，提示适当剂型的苦杏仁苷有望成为预防和治疗支气管肺发育不良的有效药物。

7. 苦杏仁苷其他作用

1）镇痛作用

有研究通过小鼠热板法和醋酸扭体法证实：苦杏仁苷具有镇痛作用，且无耐药性；小鼠给予苦杏仁苷后，无竖尾现象及烯丙吗啡诱发的跳跃反应；通过依赖吗啡大鼠撤药戒断症状代替实验，发现苦杏仁苷对吗啡成瘾大鼠突然停药后出现的戒断症状无替代作用，表明苦杏仁苷与吗啡镇痛作用不同。

2）抗炎作用：以 1、10、100、1000 mg /L 浓度的苦杏仁苷处理小鼠

BV2 胶质细胞，24 h 后观察其对脂多糖LPS诱导的炎症反应的影响，结果发现，浓度为1g /L时苦杏仁苷能明显抑制细胞生长，表现出显著的细胞毒性作用，推测其抗炎机制与下调环氧合酶-1、环氧合酶-2、诱导型一氧化碳合成酶的 mRNA 的表达，进而影响前列腺素 E2的合成、一氧化氮的生成有关。

3）延缓椎间盘退化

从 1 月龄 SD 大鼠椎间盘中分离出软骨终板并培养，观察 10^-2、10^-3、10^-4、10^-5mol/L 浓度下苦杏仁苷对 IL-1β 诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡拮抗作用，结果证实 10^-4mol/L 组的拮抗作用最明显，推测该作用可能与调节凋亡相关蛋白如 Bax、Bcl-2 蛋白的表达有关。

【参考文献】

[1] 王翔朴，王营通，李珏声 主编.卫生学大辞典.青岛：青岛出版社.2000.

[2] 夏其乐, 王涛, 陆胜民, 等. 苦杏仁苷的分析, 提取纯化及药理作用研究进展[J]. 食品科学, 2013, 34(21): 403-407.

[3] 夏其乐, 王涛, 陆胜民, 等. 苦杏仁苷的分析, 提取纯化及药理作用研究进展[J]. 食品科学, 2013, 34(21): 403-407.

[4] 李露, 戴婷, 李小龙, 等. 苦杏仁苷药理作用的研究进展[J]. 吉林医药学院学报, 2016 (2016 年 01): 63-66.