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稳定细胞株构建

稳定细胞株构建,,结构式
稳定细胞株构建
  • CAS号:
  • 英文名:Stable cell line construction
  • 中文名:稳定细胞株构建
  • CBNumber:CB95526465
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

稳定细胞株构建性质、用途与生产工艺

  • 应用 稳定细胞株构建适用于各种研究应用,如重组蛋白和抗体生产、基因编辑、功能性研究等。
  • 构建原理

    构建稳定细胞系的基本原理是将外源DNA克隆到具有某种抗性的载体上,载体被转染到宿主细胞并整合到宿主染色体中,用载体中所含的抗性标志进行筛选。最常用的真核表达载体的抗性筛选标志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418来代替新霉素进行选择性筛选,筛选得到可稳定表达目的蛋白,或者稳定表达沉默特定基因的细胞株。

  • 操作步骤 1.载体构建(表达质粒载体、病毒载体);
    2.转染/感染;
    3.目的蛋白初步检测;
    4.抗生素筛选;
    5.目的蛋白再次检测(定性/半定量);
    6.单克隆细胞株稳定性检测。
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