溴麝香草酚蓝

溴麝香草酚蓝的化学式为C₂₇H₂₈O₅SBr₂，英文简称BTB。易溶于乙醇、醚、甲醇及稀氢氧化碱溶液，稍溶于苯、甲苯及二甲苯，微溶于水，几乎不溶于石油醚。该化合物在生物学实验中常用作水生生物的呼吸试剂，生物在含有这种试剂的水中短时间生活没有影响。因为普通水是中性，pH7左右，故加入0.1%BTB溶液的水一般呈现浅绿色。如果水中二氧化碳含量增加，变为酸性时，水就会由浅绿色变为黄色。

图1.溴麝香草酚蓝变色图例

应用BTB(溴麝香草酚蓝 )法、NADH(还原辅酶Ⅰ )法和TTC(氯化三苯基四氮唑 )法对黄瓜雌雄株进行苗期鉴别。结果表明，雌、雄株提取液加入BTB液后雌株转色快于雄株，反应后5h(小时)内在 6 30nm处雌、雄株吸光值差异最大，是鉴别黄瓜雌、雄株的最佳时期。BTB法、NADH法和TTC法鉴别雌雄株其差异显著概率均为极显著，BTB法和TTC法对雌、雄株混合群体的鉴别正确率均为 100 %，二者可应用于黄瓜雌、雄株苗期鉴别，而NADH法对混合群体的鉴别正确率仅 71.4%。

以山豆根种子为研究材料，以溴麝香草酚蓝(BTB)浓度、培养温度和培养时间为指标，分别通过正交试验、单因素试验测定山豆根种子的生活力，同时用Central Composite Design响应面分析试验对测定条件进行优化。结果表明，正交试验的最佳测定条件为BTB浓度0.2%、培养温度40℃、培养时间4h，各因素对种子生活力测定的影响差异不显著，单因素试验和Central Composite Design响应面分析试验的最佳测定条件与正交试验结果一致。表明用响应面分析对BTB法测定山豆根种子生活力的条件进行优化是可行的。

溴麝香草酚蓝可用于低碳铬铁中硅含量的测定，包括以下步骤：(1)溶解，沉淀：称取低碳铬铁试样，先加入盐酸，双氧水低温溶解，并转移至烧杯中；然后加氢氟酸，摇动后放置10～30min，接着加入用硝酸钾饱和溶液沉淀硅，放置10～30min，(2)抽滤：采用抽滤法过滤，并用硝酸钾乙醇洗液洗涤洗净烧杯及沉淀物上的酸，然后将沉淀及滤纸转移至三角瓶中；(3)滴定：加入煮沸的中性水溶解沉淀物，以溴麝香草酚蓝为指示剂，以NaOH标准溶液滴定至蓝色不褪色为终点。本方法采用硅氟酸钾容量法，将硅全部以沉淀形式进行了分离，消除了其他酸性干扰，与此同时采用酸碱滴定，反应速度快且反应稳定，终点明显，方便操作人员判断，测定结果稳定，数据准确可靠。

采用聚焦微波辅助提取(FMAE)结合溴麝香草酚蓝分光光度法可测定农吉利中总生物碱。粒径为0.180 mm的样品，以甲醇为溶剂，料液比为1比25，在微波功率中火条件下提取50 min。在pH7.2的磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液中，提取得到的生物碱与溴麝香草酚蓝酸性染料形成缔合物，用三氯甲烷萃取后,在最大吸收波长417 nm处测量其吸光度。总生物碱的质量浓度在0.25~250 mg·L-1范围内呈线性，方法的检出限(3S/N)为1.5 mg·L-1。应用该方法可测定农吉利药材中总生物碱，加标回收率为105%，测定值的相对标准偏差(n=6)小于3.0%。