22978-25-2

A cell-permeable, selective and irreversible PPARγ antagonist (IC50 = 3.3 nM, 32 nM, and 2 碌M for PPARγ, PPARα, and PPARδ, respectively). Reported to covalently modify a cysteine residue in the bindin g site of PPAR. At a concentration of 10 碌M, also acts as an agonist of human pregnane X receptor (PXR) and farnesoid X receptor (FXR). Does not activate liver X receptor-a (LXRa), retinoic acid recep tor (RAR), retinoid X receptor-a (RXRa) and thyroid receptors a and b (TRa and TRb

向搅拌的2-氯-5-硝基苯甲酰氯（5.03 g，22.9 mmol）和三乙胺（3.51 mL，25.1 mmol）在0℃下于氮气氛围中保持的二氯甲烷（CH2Cl2）溶液中，缓慢滴加苯胺（2.19 mL，24.0 mmol）。反应混合物在0℃下继续搅拌5分钟，随后升至室温并搅拌15分钟。反应完成后，将溶液用乙酸乙酯（EtOAc，300 mL）稀释，并依次用1.0 M HCl、水、1.0 M NaHCO3和饱和食盐水（各100 mL）洗涤。有机相经无水硫酸镁（MgSO4）干燥后，通过旋转蒸发浓缩，得到浅黄色固体（5.32 g）。该固体通过从乙酸乙酯中重结晶纯化，得到白色固体2-氯-5-硝基-N-苯基苯酰胺（3.34 g，收率53%），熔点为155-156℃。产物经1H NMR（CDCl3, 400 MHz）确认：δ 8.63（d, 1H, J=2.7 Hz），8.28（dd, 1H, J=2.7, 8.9 Hz），7.81（br s, 1H），7.68-7.63（m, 3H），7.42（t, 2H, J=7.9 Hz），7.23（t, 1H, J=7.5 Hz）。质谱（ES-）显示m/z 275.1（[M-H]-）。元素分析（C13H9ClN2O3）计算值：C, 56.43; H, 3.28; N, 10.13；实测值：C, 56.33; H, 3.30; N, 10.03。

参考文献：

[1] Journal of Organic Chemistry, 2008, vol. 73, # 19, p. 7783 - 7784

[2] Patent: US2008/206194, 2008, A1. Location in patent: Page/Page column 4

[3] Justus Liebigs Annalen der Chemie, 1926, vol. 446, p. 225

[4] Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2009, vol. 19, # 19, p. 5576 - 5581

GW9662是一种选择性PPAR拮抗剂，作用于PPARγ，无细胞试验中IC50为3.3 nM，在细胞中作用于PPARγ比作用于PPARα和PPARδ的功能选择性强10到600倍。

Target	Value
PPARγ (Cell-free assay)	3.3 nM
PPARα (Cell-free assay)	32 nM

GW9662在PPARγ上结合Cys(285)，PPARγ是三种PPAR中保守的。GW9662是PPARγ拮抗剂，用于抑制脂肪细胞分化。GW9662抑制PPARγ激活，且抑制人乳腺癌肿瘤细胞系（MCF7, MDA-MB-468, MDA-MB-231）生长，IC50为20 μM-30 μM，说明 GW9662的PPARγ激动剂性能或PPARγ非依赖性生长抑制机制。Rosiglitazone(50 μM)与GW9662(10 μM)联用，作用于MDA-MB-231细胞，7天后，统计学上产生较低的存活细胞数。在原代鼠骨髓（BMs）和RAW264.7细胞中，PPARγ1配体能够抑制RANKL诱导的破骨细胞形成。重要的是，GW 9662(2 μM)可逆转这些配体的抑制作用，存在浓度依赖性。GW 9662(2 μM)作用于BMs，阻断IL-4对破骨细胞形成的抑制。GW 9662(1 μM) 作用于RAW264.7细胞，抑制NF-κB的RANKL激活。GW9662(10 μM)作用于甲状腺眼病患者的原代前脂肪细胞，抑制激素和激动剂诱导的脂肪细胞分化。

LPS(1 mg/kg，腹腔注射)预处理大鼠，显著减弱肾损伤和功能障碍引起的缺血/再灌注（I/R）损伤的所有标记。最值得注意的是，GW9662(1 mg/kg，腹腔注射)，可废除LPS的保护作用。