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用于农药、橡胶和氨羧络合物，大量用作草甘膦的原料

用作络合剂，也用于有机合成

亚氨基二乙酸是除草剂草甘膦的中间体。

用于草甘膦的合成，还用作氨基酸型螯合树脂的合成原料，也是橡胶、电镀工业的重要原料和中间体，还用作表面活性剂，络合剂的中间体。

制备络合剂和表面活性剂，有机合成。

其制备方法是在反应釜中加入粉状氢氧化钙、25％氨水，在搅拌下慢慢加入氯乙酸溶液，温度控制在(50±5)℃，加完氯乙酸后在该温度保持反应3h，再升温到80℃，滴加盐酸，加完后升温至95～100℃反应15min，冷却，将反应物移至结晶釜，结晶得产品。反应方程式：ClCH₂COOH+Ca(OH)₂+NH₄OH→NH(CH₂COO)₂Ca+3H₂O
NH(CH₂COO)₂Ca+3HCl→NH(CH₂CO()H)₂·HCl+CaCl₂
也可用二乙醇胺在催化剂存在下脱氢而制得亚氨基二乙醛，然后与碱反应，一部分生成亚氨基二乙酸钠，一部分还原成二乙酸胺，如此反复反应使二乙酸胺全部生成亚氨基二乙酸。
现在较为先进的方法就是二乙醇胺法。

1.氯乙酸钠法由氯乙酸配制成氯乙酸钠，再与水合肼反应生成肼抱二乙酸，然后在亚硝酸钠作用下制得亚氨基二乙酸。（1）氯乙酸钠的制备将氯乙酸溶解于水，在搅拌下缓缓加入碳酸钠，直至溶液中的气体逸尽，即得氯乙酸钠。（2）肼抱二乙酸的制备在搅拌下将氯乙酸钠溶液滴加到50%的水合肼中，反应温度不得超过25℃。加完后保温10min，反应物的pH值应在9-10之间。然后加入碳酸钠，控制温度为20-25℃。加毕，将温度升至65-70℃，保温1h。然后冷至室，用盐酸酸化析出白色固体，过滤，水洗，于60℃干燥，得肼抱二乙酸，熔点166-167℃。将肼抱二乙酸加入水中，在搅拌下缓缓加入16%的亚硝酸钠溶液，然后再加入浓盐酸，在25℃反应1.5h。将反应液蒸发浓缩至原体积的1/3，放置析出结晶，过滤，于60℃干燥，得亚氨基二乙酸。2.用氢氰酸直接合成。将氢氰酸、乌洛托品和甲醛混合水溶液在管式反应器中反应，得到亚氨基二乙腈。3.氯乙酸和氨基乙酸法。4.氨基乙酸和乙醇腈法。5.氯乙酸和氨反应法。