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苄星青霉素

供应商 方法名称 仪器设备 应用范围 方法原理 试剂 试样制备 操作步骤

方法名称

苄星青霉素原料药－苄星青霉素－高效液相色谱法

仪器设备

仪器设备： 1. 仪器
1.1 高效液相色谱仪
1.2 色谱柱
十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按苄星青霉素峰计算应不低于2000。
1.3 紫外吸收检测器
2. 色谱条件
2.1 流动相：0.05mol/l磷酸盐缓冲液+乙腈=75+25
2.2 检测波长：225nm
2.3 柱温：室温
2.4 流速：1ml/min
试样制备： 1. 磷酸盐缓冲液（0.05mol/l）
取磷酸二氢钾6.8g，加水900ml使溶解，用1mol/l氢氧化钠溶液调节ph值至6.0，加水至1000ml，摇匀。
2. 氢氧化钠溶液（1mol/l）
取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。取澄清的氢氧化钠饱和溶液56ml，加新沸过的冷水使成1000ml，摇匀。
3. 对照品溶液的制备
精密称取青霉素对照品约40mg，置50ml量瓶中，加乙腈10ml和甲醇5ml使溶解，用上述0.05mol/l磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。
4. 供试品溶液的制备
精密称取供试品53mg，置50ml量瓶中，加乙腈10ml和甲醇5ml使溶解，用上述0.05mol/l磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

应用范围

本方法采用高效液相色谱法测定苄星青霉素原料药中苄星青霉素的含量。
本方法适用于苄星青霉素原料药。

方法原理

供试品加乙腈和甲醇溶解，用磷酸盐缓冲液稀释，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长225nm处检测苄星青霉素的峰面积，计算出其含量。

试剂

1. 乙腈
2. 磷酸盐缓冲液（0.05mol/l）
3. 氢氧化钠溶液（1mol/l）
4. 甲醇

试样制备

1. 磷酸盐缓冲液（0.05mol/l）
取磷酸二氢钾6.8g，加水900ml使溶解，用1mol/l氢氧化钠溶液调节ph值至6.0，加水至1000ml，摇匀。
2. 氢氧化钠溶液（1mol/l）
取氢氧化钠适量，加水振摇使溶解成饱和溶液，冷却后，置聚乙烯塑料瓶中，静置数日，澄清后备用。取澄清的氢氧化钠饱和溶液56ml，加新沸过的冷水使成1000ml，摇匀。
3. 对照品溶液的制备
精密称取青霉素对照品约40mg，置50ml量瓶中，加乙腈10ml和甲醇5ml使溶解，用上述0.05mol/l磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，即为对照品溶液。
4. 供试品溶液的制备
精密称取供试品53mg，置50ml量瓶中，加乙腈10ml和甲醇5ml使溶解，用上述0.05mol/l磷酸盐缓冲液稀释至刻度，摇匀，即为供试品溶液。
注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。

操作步骤

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ml，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长225nm处测定峰面积，计算出供试品中青霉素的含量，每1mg的c16h18n2o4s相当于1780青霉素单位。
苄星青霉素生产厂家