储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:贾第虫通用PCR检测试剂盒
英文名称:Giardia spp.PCR
编号: FSP1700
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
CNTNAP4接触蛋白相关蛋白4抗体特价促销anti- GRB7 antibody细胞单胺氧化酶B型(MAO-B)活性化学发光法定量检测试剂盒锌指蛋白RIZ1抗体
Cadherin 8钙粘附蛋白8抗体特价促销anti- GREM2 antibody组织单胺氧化酶B型(MAO-B)活性化学发光法定量检测试剂盒组蛋白精氨酸甲基转移酶6抗体
Cadherin 8钙粘附蛋白8抗体特价促销anti- GRHPR antibody体液单胺氧化酶B型(MAO-B)活性化学发光法定量检测试剂盒丝氨酸蛋白酶8抗体
Cadherin 9钙粘附蛋白9抗体特价促销anti- GRIA4 antibody细胞过氧化氢(HYDROGEN PEROXIDE)活性比色法定量检测试剂盒p21活化蛋白激酶ARHG7抗体
MPZL2/EVA1髓鞘蛋白P0样蛋白2抗体特价促销anti- GRID1 antibody组织过氧化氢(HYDROGEN PEROXIDE)活性比色法定量检测试剂盒血小板源性生长因子受体β样蛋白抗体
HDL/high density lipoprotein高密度脂蛋白抗体特价促销anti- GRIK2 antibody血液过氧化氢(HYDROGEN PEROXIDE)活性比色法定量检测试剂盒抑癌蛋白DLP1抗体
ARSB芳基硫酸酯酶B抗体特价促销anti- GRIM19 antibody体液过氧化氢(HYDROGEN PEROXIDE)活性比色法定量检测试剂盒蛋白激酶C delta结合蛋白抗体
CDHF15/FAT3钙粘蛋白15抗体特价促销anti- GRIP1 antibody细菌过氧化氢(HYDROGEN PEROXIDE)活性比色法定量检测试剂盒转录因子RPF1抗体
贾第虫通用PCR检测试剂盒PEG 200 聚乙二醇200phospho-PTK9/TWF1(Tyr321) 磷酸化蛋白酪氨酸激酶9抗体犬艾利希体探针法荧光定量PCR试剂盒α-MEM 高糖培养基
PEG 400 聚乙二醇400UBE2J2 泛素蛋白连接酶J2抗体查菲艾利希体探针法荧光定量PCR试剂盒改良型RPMI 1640 高糖培养基
Glutathione, Reduced (GSH) 还原型谷胱甘肽(GSH)UBE2M 泛素蛋白连接酶M抗体弗格森艾利希体探针法荧光定量PCR试剂盒一次性针头式滤器 (PES膜) 直径33mm 250个/盒 过滤血清 Millipore
Glutathione, Oxydized (GSSG) 氧化型谷胱甘肽(GSSG)UBE2Q1 泛素蛋白连接酶Q1抗体里氏埃里希氏体探针法荧光定量PCR试剂盒一次性针头式滤器 (PVDF膜) 直径33mm 250个/盒 Millipore
D-Biotin D-生物素UBE2U 泛素蛋白连接酶U抗体反刍兽艾利希体探针法荧光定量PCR试剂盒一次性针头式滤器 (PVDF膜) 直径33mm 250个/盒 Millipore
NTP Set (ATP, CTP, UTP, GTP, 100 mM each)UBE2W 泛素蛋白连接酶W抗体艾利希体属通用探针法荧光定量PCR试剂盒冻存管 500支 '2.0ml螺口无盖棕色离心管,可立,聚丙烯,未灭菌 500/包,8包/箱
GTP(100 mM) 鸟苷三磷酸溶液(100 mM)CBLL1/Ecadherin binding protein E7 上皮钙粘附分子结合蛋白E7啮蚀艾肯菌探针法荧光定量PCR试剂盒袋装吸头 '1000ul蓝色吸头,斜嘴,未灭菌,袋装 1000/包,8包/箱
Bis-Acrylamide 甲叉双丙烯酰胺BTRC2/beta TRCP2 BTRC2蛋白抗体艾美耳球虫属通用探针法荧光定量PCR试剂盒盒装无菌吸头 '1000ul盒装灭菌蓝色吸头,100支/盒,10盒/大盒,5大盒/箱
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
鹦鹉热衣原体PCR试剂盒品牌以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。