MDA-MB-453 人乳腺癌细胞系

"MDA-MB-453 人乳腺癌细胞系
细胞背景资料：该细胞系由CailleauR在１９７６年从一名４８岁的患有转移性乳腺癌的白人女性的心包渗出液中分离建立的。该细胞表达FGF的受体。 
细胞形态：上皮细胞样 
体内细胞培养及其操作步骤：【瘤细胞悬液接种】１)无菌选取生长良好(有光泽，淡红色)瘤组织或对数生长期培养瘤细胞；２)在PBS中将瘤组织剪碎后用匀浆器研磨，经８０～１００目筛网过滤成细胞悬液；３)培养细胞应用PBS洗两遍；４)计数并调整细胞浓度至１０７～１０８／ml；５)常规消毒后，于接种部位(通常为背部或腋窝腹股沟皮下)用医用注射器皮下潜行一段后注入细胞悬液(０.１ml／部位，＞１０６细胞)。初次接种成功率低，细胞数尽可能多一些；６)次日注意观察动物一般情况。初次接种一般有一段较长的潜伏期，以后随着传代潜伏期逐渐缩短，最后固定为一个相对稳定的时间。【腹水瘤的建立与腹水瘤的接种】将实体瘤细胞直接种于小鼠腹腔、腹壁或其他部位，引起腹水，腹水中含有瘤细胞，将这种腹水反复传代，即可成为腹水瘤。初次传代时，腹水常呈血性(含大量红细胞)，反复传代后腹水逐渐变成乳白色。腹水瘤的接种过程如下。１)将冻存或培养的腹水瘤细胞离心和洗涤，进行细胞计数；２)消毒动物，左下腹穿刺接种１０６腹水瘤细胞；３)接种腹水瘤细胞后约７~１２d，待小鼠腹部明显膨大。用碘酒棉球消毒小鼠腹部，用９号针头抽取腹水，也可行腹部解剖后，用滴管吸取。每只小鼠可抽３~５ml；４)抽取的腹水经３０００rpm离心１５min，收集上清，分装冻存备用。 
细胞生长：贴壁 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
MDA-MB-453 人乳腺癌细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
悬浮细胞不容易转染：悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面，在培养液中呈悬浮状态生长，如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染，其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂，脂质体转染是基于电荷吸引原理，先形成脂质体-DNA复合物，散布在细胞周围，然后通过细胞的内吞作用，将目的基因导入细胞内，而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞高出很多倍，所以，脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次，脂质体试剂的毒性较大，这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外，悬浮细胞不易培养，易死亡，也给细胞转染造成了一定的困难。为了提高悬浮细胞的转染效率，可以使用非脂质体的转染试剂，如纳米材料的。也可以使用电转染方法，针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的，电击对细胞有一定的损伤，选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂，可以将电击对细胞的伤害降到最低，悬浮细胞不易转染，选对试剂及良好的细胞培养环境才是关键。 
细胞传代方法：１：２-１：４传代；２-３天换液１次 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：贴壁生长 
MDA-MB-453 人乳腺癌细胞系
【胰蛋白酶消化操作】１)加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗(冲洗)，加入适量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以盖住细胞，消化温度是３７℃；２)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度；(３)吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】１)吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液；２)吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入１０ml离心管中；３)平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以１０００转/分钟离心６-８分钟；４)弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入２ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】１)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于５×１０５/ml。最后要做好标记；２)分装：将细胞悬液吸出分装至２～３个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖；３)继续培养：用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO２培养箱中继续培养。传代细胞２小时后开始贴附在瓶壁上。 
细胞形态特性：上皮样；多角形 
McA-RH 7777细胞系相关产品：H157细胞、Gerner 7666细胞、COR-L279细胞 
NCI/ADR-RES细胞系相关产品：FM-88细胞、DC 2.4细胞、L-cell细胞 
NCI-H1650细胞系相关产品：P30/0HK细胞、Normal fibroblast-10细胞、SKRC-42细胞 
KMS11细胞系相关产品：B 95-8细胞、HCA-7细胞、RBMEC细胞 
JB6 Cl 30-7b细胞系相关产品：T-ALL-1细胞、Jurkat-77细胞、NCI-H2030细胞 
Human Melanoma Cell Bowes细胞系相关产品：Jeko1细胞、hEM15A细胞、Ca 9-22细胞 
H-345细胞系相关产品：V79细胞、X63.Ag8.653细胞、MDA-PCa-2b细胞 
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H526细胞系相关产品：PLCPRF5细胞、HMy2.CIR细胞、GTL-16细胞 
P3/NS1/1-Ag4-1细胞系相关产品：EU-3细胞、GM 2132细胞、SHP-77细胞 
ROS17/28细胞系相关产品：Immortalized Human Hepatocytes细胞、MC57G细胞、IGROV-1细胞 
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NHEK细胞系相关产品：MDA 435细胞、526 mel细胞、OCI-Ly 18细胞 
WiDrTC细胞系相关产品：SNU-251细胞、H-1954细胞、CHO-K1细胞 
HFT8810细胞系相关产品：MV 3细胞、Bac12F5细胞、CCD1095Sk细胞 
MDA-MB-453 人乳腺癌细胞系
Hs600T细胞系相关产品：SNK1细胞、Hs832T细胞、U20-S细胞 
WM 2664细胞系相关产品：TE-9细胞、SK-MEL24细胞、MV411细胞 
Medical Research Council cell strain-9细胞系相关产品：NCIH441细胞、T24(ECV304)细胞、H4-II-E-C3细胞 
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TMK-1细胞系相关产品：MGHU3细胞、SF 295细胞、BOWES细胞 
CG4细胞系相关产品：PaTu 8988s细胞、PLC/PRF/5细胞、HCC1954-BL细胞 
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GLC-82细胞系相关产品：C2C12细胞、NCI-H292细胞、1E8-H细胞 
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NCIH187细胞系相关产品：J774.A1细胞、CMT.64细胞、HMEC1细胞 
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NCI-H1650细胞系相关产品：P30/0HK细胞、L5178YR细胞、Hepa-RG细胞 
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