"RLE-6TN epithelioid cells大鼠肺泡Ⅱ型细胞系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞形态：上皮细胞样
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法：一、加入胰酶等细胞脱落后，再加培养基中止胰酶作用，离心传代；二、加入胰酶后，镜下观察待细胞始脱落时，弃胰酶，加培养液分瓶。但前者太麻烦，而后者有可能对细胞施加胰酶选择，因为总是贴壁不牢的细胞先脱落，对肿瘤细胞来说，这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，弃之，再加入适量胰酶作用１０s-４０s(根据细胞消化的难易程度)，弃之，这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞，可以用２%利多卡因消化５-８分钟，然后再弃去，加培养基吹打也可以，对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把旧培养液吸的干净一点，直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后，用０.０４%的EDTA冲洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室温孵育５min，弃取大部分EDTA，加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积１/１０v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好，有证据吗？培养的BASMC：倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶约６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入适量新培养基中和，并分瓶这种方法简单、省事；效果很好并且不损失细胞！
HCC-1954细胞系相关产品：CMECs细胞、P3-X63Ag8细胞、EST50细胞
alphaTC1 Clone 6细胞系相关产品：CCRF.CEM细胞、HBE135-E6E7细胞、ZR-75-1细胞
BT 549细胞系相关产品：DU4475细胞、HS-729细胞、Mouse podocyte细胞
细胞生长：贴壁
RLE-6TN epithelioid cells大鼠肺泡Ⅱ型细胞系
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支)
最近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，１XPBS漂洗两次，加入１mlEDTA-Tripsin（１００mm皿为例），３７度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代最重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-２、A５４９、Hela、SGC-７９０１几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理５-６min，C２C１２、COS-７、NIH-３T３比较容易脱落，２min足矣，P１９Cl６和２９３细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。
Ramos (RA 1)细胞系相关产品：hESC细胞、K7M2 wt细胞、SW-1990细胞
MGECs细胞系相关产品：SKBR-3细胞、Hs 611.T细胞、QBC(939)细胞
C22细胞系相关产品：OVCAR 420细胞、Ca759细胞、NCIH1417细胞
Jijoye细胞系相关产品：D283细胞、SRA 01/04细胞、Mo 59J细胞
HS-5细胞系相关产品：HEK293-F细胞、HEK293细胞、TN5B14细胞
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
RLE-6TN epithelioid cells大鼠肺泡Ⅱ型细胞系
细胞生长特性：贴壁
细胞形态特性：上皮细胞样
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：１)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加２-３ml ０.２５%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在１-２min)；２)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；３)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；４)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周２-３次)，待细胞密度达到８０%以后重复１项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)１)收到细胞后请尽快更换为含１５%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加１０%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过７２小时)；２)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径６cm的培养皿进行传代培养；３)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
HT-1080细胞系相关产品：AMJ2C8细胞、Capan-2细胞、U266细胞
C3H/10T1/2 CL8细胞系相关产品：MT4细胞、NUGC3细胞、MCF.10A细胞
Hs 636.T细胞系相关产品：EFO-27细胞、HCC1428细胞、PAa细胞
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RLE-6TN epithelioid cells大鼠肺泡Ⅱ型细胞系
SW-954细胞系相关产品：HB 611细胞、KG1细胞、PC 12细胞
GM01232E细胞系相关产品：P3.times.63 Ag8.653细胞、CATH.a细胞、RS 4;11细胞
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OCI/AML2细胞系相关产品：BrCL18细胞、CORL26细胞、MDA415细胞
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Tca8113细胞系相关产品：Hs 695T细胞、SUDHL-5细胞、Tu-212细胞
H446细胞系相关产品：SUIT 2细胞、OV-CA 432细胞、SF 767细胞
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Jurkat (clone E6-1)细胞系相关产品：SW756细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞、MOLT-16细胞
KU-812细胞系相关产品：PC14细胞、2008细胞、NKT细胞
MDA MB 436细胞系相关产品：U266-B1细胞、EAC-E2G8细胞、KM12-SM细胞
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PAEC细胞系相关产品：HCT-8/V细胞、293/EBNA-1细胞、2B4-L细胞
COR-L26细胞系相关产品：EJ 138细胞、Psi2 DAP细胞、JB-6细胞
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HCC1359细胞系相关产品：SU-DHL2细胞、MC3T3-E1 Subclone 24细胞、LL/2 (LLC1)细胞
H1993细胞系相关产品：Calu-1细胞、U20-S细胞、Centre Antoine Lacassagne-39细胞
NCI-H740细胞系相关产品：LA-N-6细胞、AM细胞、Panc_08_13细胞
C4-I细胞系相关产品：BpRc1细胞、D-341 Med细胞、Hs 888.Lu细胞
WML2细胞系相关产品：UMR-106细胞、BCP1细胞、K7M2细胞
NIH:OVCAR-3细胞系相关产品：Super Tube细胞、HDLM-2细胞、IMR32细胞
COLO320 DM细胞系相关产品：RCC 7860细胞、A431/P细胞、MDA-1386细胞
SCL2细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-415细胞、4175细胞、TFK-1细胞
RC-K8细胞系相关产品：HEK293-FT细胞、Molm 14细胞、KLN205细胞
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MOLT-3细胞系相关产品：HKBML细胞、NE1-E6E7细胞、BEL-7402细胞
NCI-H211细胞系相关产品：H22细胞、JG细胞、P3 (Jiyoye)细胞
RLE-6TN epithelioid cells大鼠肺泡Ⅱ型细胞系
RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]细胞系相关产品：HPDE细胞、TOV-21G细胞、H-2107细胞
RA 1细胞系相关产品：NCTC 1469细胞、RLE-6TN细胞、C-4 I细胞
MNNG-HOS细胞系相关产品：OCI-LY-3细胞、SKNDZ细胞、NCTC 3960细胞
Hs 636 T细胞系相关产品：SNG-M细胞、AU 565细胞、A2780细胞
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