坎格列净

Canagliflozin是一种高效的，选择性SGLT2抑制剂，作用于hSGLT2，无细胞试验中IC50为2.2 nM，比作用于hSGLT1选择性高413倍。

靶点

体外研究

Canagliflozin 是新型C-葡萄糖苷，具有噻吩环。Canagliflozin 抑制 Na+依赖性的14C-AMG 吸收，这种作用存在浓度依赖性。Canagliflozin作用于 CHO-hSGLT1 和mSGLT1 细胞，抑制 14C-AMG 吸收，IC50 分别为 0.7 μM 和 >1 μM。Canagliflozin作用于 L6成肌细胞，抑制 50%以下 (非-Na+-关联的) GLUT调节的2H-2-DG吸收。在50 µM DNJ存在时，Canagliflozin (10 µM) 或phlorizin (3 mM) 单独作用于注射空白对照的卵母细胞，不影响电流。DMSO 和 Canagliflozin 10 µM 作用于注射SGLT3-的卵母细胞，抑制DNJ诱导的电流，分别抑制 15.6% 和 23.4%。

体内研究

Canagliflozin 处理高脂肪饲料饲喂的KK(HF-KK)小鼠，具有显著的抗高血糖效果。Canagliflozin 按30 mg/kg剂量口服处理给药雄性SD大鼠，诱导葡萄糖外排，处理24小时，每 200 g 体重外排3,696 mg 糖。药代动力学研究显示Canagliflozin 口服处理药效更高。Canagliflozin 按3和 10 mg/kg剂量分别静脉注射和口服处理给药雄性SD 大鼠, 测定AUC0−inf, po, t1/2 和生物有效性分别为 35,980 ng·h/mL, 5.2 小时,和 85%。Canagliflozin口服处理，抑制肾小管中的SGLT2，很可能是因为持续抑制葡萄糖的重吸收。广泛的UGE可反映 Canagliflozin 在体内优秀的药代动力学特性，及对SGLT2的高效抑制。由于大部分过滤的葡糖糖在肾小管中被SGLT2 重吸收，所以新型化合物将是很有效的抗糖尿病试剂。Canagliflozin 按3 mg/kg 剂量单独口服处理高糖高脂肪饲料喂养的KK(HF-KK)小鼠，显著降低血糖水平，不影响食物吸收。处理6个小时，与对照组相比，血糖水平降低48%。相反, Canagliflozin作用于正常血糖小鼠，只轻微影响血糖水平。因此, Canagliflozin 在治疗T2DM时可控制高血糖，也降低低血糖风险。

• Cell lines: L6 细胞系
• Concentrations: 0-10 μM
• Incubation Time: 24 小时
• Method: 使用从大鼠骨骼肌提取的细胞系L6,检测 Canagliflozin 作用于葡糖糖载体 1 (GLUT1)活性的效果。细胞培养在含5.6 mM葡萄糖，补充10% 胎牛血清的DMEM培养基中，按每孔3.0×105个细胞的密度接种到14孔板中，在含5% CO2的环境中37oC下培养24小时。使用Kreb's ringer 磷酸HEPES buffer (pH 7.4,150 mM NaCl,5 mM KCl,1.25 mM MgSO4,1.25 mM CaCl2, 2.9 mM Na2HPO4, 10 mM HEPES)漂洗2次细胞，然后与Canagliflozin 溶液(250 µL, 10 uM) 在室温下预温育5分钟。加入50 µL 4.5 mM 2-DG (作为GLUTs的底物)/3H-2-DG(0.625 µCi)开始反应，随便在室温下温育15分钟。 通过吸取温育混合物而使2-DG 吸收停止。使用冰冻PBS立刻冲洗细胞3次。使用0.3 N NaOH萃取样本,通过液体闪烁法测定放射性。

动物实验：

• Animal Models: KK (HF-KK) 小鼠
• Formulation: 0.2% CMC/0.2% Tween-80
• Dosages: 10 mg/kg
• Administration: 口服处理

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.2496 mL

11.2481 mL

22.4962 mL

5 mM

0.4499 mL

2.2496 mL

4.4992 mL

10 mM

0.2250 mL

1.1248 mL

2.2496 mL

50 mM

0.0450 mL

0.2250 mL

0.4499 mL