水溶性汉防己甲素

概述

汉防己甲素(tetrandrine,Tet)又名粉防己碱,是从防己科植物粉防己(StephamiatetrandraS.Moore)块根中提取的一种双苄基异喹啉类生物碱,属于双苄基异喹啉类化合物，为新型钙拮抗剂，是粉防己的主要有效成分；具有消炎、镇痛、降压、抗矽肺、降低血糖、抗自由基损伤、抗肝纤维化和等抗肿瘤多种药理作用；临床用于单纯性硅肺和煤硅肺。也用于早期轻度高血压、风湿痛、关节痛、神经痛等。同时还用于肝癌、肺癌、结肠癌、膀胱癌以及白血病的治疗。

图1为汉防己甲素的结构式

汉防

己汉防己为防己科千金藤属物(StephaniatetrandraS.Mcore)的干燥块根,根呈现不规则圆柱形,秋季采挖,洗净去皮晒至半干,然后切成小段,再干燥即为它的采制方法。汉防己的有效成分为生物碱主要是汉防己甲素和汉防己乙素。生物碱的总含量为1.5%～2.3%,主要为汉防己甲素,含量约为1%,汉防己乙素,含量约为0.5%,轮环藤酚碱,含量为0.2%;以及其它数种微量生物碱。

理化性质

无色针晶,不溶于水和石油醚,易溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和氯仿等有机溶剂及稀酸水中,可溶于苯,mp216℃,有双熔点现象,自丙酮中结晶者,150℃左右熔后加热又固化,至213℃复熔。

药理作用1.对肝纤维化的防治作用Tet可使血清Ⅲ型前胶原、血清及肝HA明显降低,肝内胶原沉积减少,提示Tet可用于治疗慢性肝病之肝纤维化。2.对缺氧性肺动脉高压的作用在缺氧性肺动脉高压犬,Tet能明显降低升高的肺动脉压和肺血管阻力,并能提高CO和氧搬运能力,而对系统循环和血气水平无明显影响。Tet主要通过抑制肺小动脉胶原纤维的增生和抑制缺氧引起的肺血管增厚和肌化,使肺小动脉管腔狭窄明显减轻,肺动脉压降低,从而部分阻抑肺动脉高压的发展。3.对矽肺的治疗作用在制备Proα1(Ⅰ)、Proα1(Ⅲ)胶原cDNA探针的基础上,采用斑点及原位分子杂交技术,观察Tet对矽肺组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原基因的mRNA的影响。由此认为矽肺组织胶原积聚是由石英粉尘引起胶原基因的表达增强所致，TET能直接或间接地抑制胶原基因的转录,从而减少病变组织中胶原蛋白的合成。4.对高血压的治疗作用Tet有显著降压作用并能极显著降低高血压患者血内脂质过氧化物(LPO)、血栓素(TXB2)水平,极显著升高SOD、前列环素(6-keto-PGF1α)水平,降低TXB2/6-keto-PGF1α比值。汉防己甲素降压机制是阻滞心肌和血管平滑肌电压依赖式钙通道及升高6-keto-PGF1α水平所致。5.对心绞痛的治疗作用Tet有显著降低心肌耗氧指数的作用,与硝苯吡啶相比,无显著差异。因此Tet是一个治疗心绞痛、预防心肌梗死和减轻心肌缺血-再灌注损伤的有效药物。6.对眼科疾病的治疗作用(1)对实验性葡萄膜炎的治疗作用：Tet抑制实验性葡萄膜炎,除了其抗炎作用外,还与其抑制体液和细胞免疫反应有关。(2)对前色素膜炎的作用：Tet的抗前色素膜炎的机制可能与其降低细胞内。(3)对视网膜母细胞瘤的作用:Tet在低剂量(0.1μg/mL)时,虽对Rb44细胞无直接抑制作用,但可明显增加放射线对Rb44细胞的杀伤作用。随着药物浓度的增加,细胞杀伤率增高,放射前后给药无明显差别。Tet主要通过抑制细胞的潜在致死性损伤的修复增加放疗效果。7.增强抗癌药物的作用用MTT法检测柔红霉素(DNR)及高三尖杉酯碱(HHT)对白血病细胞的毒性作用,并观察Tet对两种化疗药物细胞毒性的影响。结果Tet可明显提高DNR及HHT对耐药细胞(K562Chemicalbook/AO2,K562/HHT)的毒性作用。提取分离1.总生物碱的提取和亲脂性与亲水性生物碱的分离汉防己甲素属生物碱,植物原料为粉防己(根)。提取分离的原理为较高含量的或主要成分和溶解差异,称为酸水渗漉,分离方法如下:2.低压柱层析分离汉防已甲素和乙素低压柱层析在低压下(0.5～3kg/cm2,一般0.3～1.2kg/cm2)采用颗粒直径介于经典柱层析(100～200μm)和HPLC(～37μm)之间的薄层层析用硅胶(或氧化铝)H或G(50～75μm)作为填充剂的一种柱层析柱,其基本原理与HPLC相同,分离效果也介于经典柱与HPLC之间,用减压干法装柱,铺层紧密均匀,层析带分布集中整齐,同时薄层层析的分离溶剂系统可以直接用于低压柱层析,它是一种分离效果较好,设备简单,操作方便,快速的方法。适宜和于天然产物的常量制备性分离。(1)装柱减压干法装法,层析柱规格:柱长30cm,内径2cm,共装硅胶约30g(高约22cm)2.2拌样加样取汉防已碱约150mg,加少量丙酮热溶(刚溶为度)用滴管加到1.5g硅胶上,仔细拌匀,水浴上蒸干,碾细,通过一个长颈漏斗小心加在柱顶,轻轻垂直顿击,待样品表面平整不拌动时,上面再盖约1～2cm高的空白硅胶,再加盖一园形滤纸片,压紧。(2)洗脱先检查从空压机至层析柱各阀门管道是否正常,关紧各个阀门,开动空压机至额定压力(5.8kg/cm2)待用。用滴管顺层析柱柱壁仔细加入少量洗脱剂(环已烷-惭酸乙酯-二乙胺/6:2:0.8),当液面达到一定高度时,再一次加入其余洗脱剂(共约250ml),迅速在柱顶上装上玻璃标口塞接头,用铁夹压紧(防加压时接头冲开),小心开启空压机阀门,再开针形阀和空气过滤减压器,(注意:压力过大。玻璃柱会炸,一般2kg是安全的,必要时可戴防护面罩)调动所需压力,0.6～1.2kg/cm2,约40分钟后流出,控制流速1ml/分,每10分钟左右一管,收12～15份,洗脱全过程约3小时。(3)检查各流份分别移入小玻璃蒸发器中,于水浴上浓缩,分别通过TLC检查,吸附剂:硅胶G,展开剂:环已烷-乙酸乙酯-二乙胺/6:3:1,改良碘化铋钾试剂喷雾显色,以汉防已甲素、乙素为标准品对照,合并相同组分,分别获得甲、乙素粗品,用丙酮重结晶,测定。

理化鉴别

取本品粉末1g,加乙醇15ml,加热回流1小时,放冷,滤过,滤液蒸干,残渣加乙醇5ml使溶解,作为供试品试液。另取汉防己碱与防己诺林碱对照品,加氯仿制成每1ml中各含1ml的混合溶液,作为对Chemicalbook照品试液。吸取上述两种试液各5μl,分别点于同一硅胶G薄层板上,以氯仿-丙酮-甲醇(6:1:1)为展开剂,展开,晾干,喷以释碘化铋钾试液。供试剂品色谱中,以与对照色谱相应的位置上,显相同颜色的斑点。

应用

1.免疫系统疾病汉防己甲素可明显抑制关节炎的发展且作用强于阿司匹林，可应用于类风湿关节炎治疗。2.心血管系统疾病汉防己甲素不仅有钙拮抗作用，可抑制心室肌细胞的T型和L型钙通道，且与M受体相互作用，能阻断钙激活的钾通道，成为治疗阵发性室上性心动过速的一种治疗方法。3.消化系统汉防己甲素在保护肝细胞和抗肝纤维化方面具有一定作用。4.眼科疾病汉防己甲素用于眼部炎症治疗，包括葡萄Chemicalbook膜炎、角膜炎及其导致的视网膜病变。5.其他汉防己甲素对链霉素所致的急性肾毒性效应有明显的拮抗作用，能减轻肾小管上皮细胞的凋亡及增殖，保护肾脏功能，对急性缺血再灌注肾损伤有保护作用，能明显降低血清肌酐和尿素氮水平，改善肾小球滤过率与肾血浆流量，延缓肾小球硬化的发展。有关汉防己甲素的概述、理化性质、药理作用、应用等是由Chemicalbook的丁红编辑整理。（2016-02-01）

用法与用量

用于硅肺：口服，60～100mg，3次/d，服药6d停药1d。3个月为1个疗程。用于早期轻度高血压Chemicalbook：口服，100mg/次，3次/d。亦可用于重症高血压及高血压危象：静脉注射，120～180mg/次，2次/d。

注意与禁忌

可有轻度嗜睡、乏力、恶心、上腹部不适等。长期服用可引起面部色素沉着，停药后可消退。静脉注射可有局部疼痛。肝、肾功能不全者慎用或禁用。服药期间应每3个月检查1次肝功能、心电图。

化学性质

 来源于防己科植物粉防己根用途 抗风湿与镇痛药，用于风湿、高血压、肺癌等。用途 抗风湿与镇痛药，用于治疗风湿、高血压、肺癌等病症