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Bst聚合酶/Sapphire Bst GreenMaster冻干液：用于等温DNA扩增的冻干粉，配合绿色荧光DNA染料。

艾美捷Bst聚合酶/Sapphire Bst GreenMaster冻干液（PCR-398S）：

描述：

Saphir Bst Green Master Lyophilisate是一种用于等温DNA扩增的冻干主混合物，使用LAMP（环介导等温扩增）技术，并配合绿色荧光DNA染料。该混合物基于Bst聚合酶的活性，是快速且稳健地在恒定温度（60至65°C）下扩增DNA的理想选择。该酶显示出高链置换活性，可产生高达10^9的扩增因子，相当于PCR检测中大约30个循环。

Saphir Bst Green Master Lyophilisate允许在10-20分钟内检测到目标基因。

Bst聚合酶内容：

Saphir Bst Green Master Lyophilisate

Saphir Bst聚合酶、dNTPs（脱氧核苷酸三磷酸）、反应缓冲液、绿色DNA插入染料、添加剂和稳定剂，以冻干形式提供，最终检测体积为20微升。

Bst聚合酶处理：

Saphir Bst Green Master Lyophilisate以8管条或96孔板的形式提供，预装有完整的主混合物，以干燥、室温稳定的格式。该冻干粉结合了高性能与使用的便利性和稳定性。无需冷冻、解冻或在冰上移液。剩余的少量移液步骤最大限度地减少了错误或污染的风险。

每个小瓶包含所有组分（除引物和模板外），适用于20微升LAMP检测。

要执行检测，只需向小瓶中加入引物混合液并添加DNA模板。

该冻干粉还可以与ROX参考染料一起使用，在与ROX信号评估兼容的PCR仪器中。在这种情况下，应将ROX染料（#PCR-351）以1倍浓度添加到PCR反应中。

Bst聚合酶检测设计：

等温扩增是一种极其敏感的检测方法，应小心避免将DNA污染到设置区域和设备中，以防止与之前反应的DNA交叉污染。可能会出现无模板对照中的扩增问题，原因是携带污染或非特异性结合引物或引物二聚体的形成。

Bst聚合酶引物设计：

通常使用4种不同的引物来识别6个不同的DNA区域，允许特异性扩增目标基因。另外一对引物可以进一步加速扩增，将总检测时间缩短到10-20分钟。

由于反应序列复杂，手动设计引物可能具有挑战性。为了简化设计过程，建议使用引物设计软件。

由于计算机设计的引物的灵敏度和非模板扩增可能会有所不同，建议在选定最终组之前评估2-4组真实的引物集。

Bst聚合酶检测设置：

使用无菌过滤头的移液管，并在与DNA制备或分析不同的区域进行设置。在所有扩增中都应包括无模板对照。

首先，准备一个10倍浓度的引物预混合液。其次，设置等温扩增检测：

Bst聚合酶分配主混合物

彻底振荡引物/探针混合液以确保均匀性。

向每个PCR管或板孔分配20微升。

使用特定的等温扩增检测仪器或实时PCR循环仪来运行检测

将仪器设置为在60至65°C之间的恒定孵化温度（取决于引物的退火温度）

以1分钟的间隔测量荧光强度，持续Z多30分钟。

Bst聚合酶相关产品：

Saphir Bst Polymerase, #PCR-389

Saphir Bst GreenMaster, #PCR-387

Saphir Bst GreenMaster high ROX, #PCR-388

https://www.amyjet.com/products/PCR-398S.shtml