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发酵虫草菌粉

发酵虫草菌粉

中文名称:发酵虫草菌粉
英文名称:Fermented Cordyceps powder
CAS号:
分子式:
分子量:0
EINECS号:
Mol文件:Mol File
发酵虫草菌粉 结构式

发酵虫草菌粉 用途与合成方法

冬虫夏草是麦角菌科植物冬虫夏草菌的子座及其寄主蝙蛾科昆虫虫草蝙蝠蛾等的幼虫尸体的复合体,具有补虚损、益精气、止咳化痰等功效,是一种传统名贵滋补中药材。现代药理学研究发现其具有调节免疫、抗炎、抗纤维化、延缓衰老等多种作用。然而由于其主要生长于西藏、青海、云南、贵州、四川、甘肃等高寒山区,随着自然环境的变化及开采过度的影响,产量日益减少,价格逐年升高,已无法满足市场的需要。野生资源的匮乏促使了虫草发酵技术及规模化生产的快速发展,近年来以人工发酵虫草菌粉为原料的制剂逐渐增多,如金水宝胶囊、百令胶囊、至灵胶囊等。人工培育的发酵虫草菌粉的主要化学成分与冬虫夏草类似,且价格相对较低,已逐渐被大众接受和认可。近年来大量研究发现发酵虫草菌粉可用于治疗多种呼吸系统疾病。 冬虫夏草为麦角科植物真菌,寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体,是中国传统的名贵中药材。《中国药典》记载冬虫夏草具有补肺益肾,止血,化痰等功效;冬虫夏草的主要活性成分是虫草素,具有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳等多种功效,是不可多得的滋补药材。冬虫夏草真菌具有专一寄生属性并需要特殊的生存环境,人类过度的挖掘及生态环境的破坏使其价格不断攀升,发展冬虫夏草的替代品成为必然趋势。
国内研究者通过分离天然虫草菌株进行深层发酵得到发酵虫草菌粉,再对其进行制剂,即得人工虫草。目前,市场上人工虫草主要有百令、金水宝、心肝宝和宁心宝4大商业品牌。百令、金水宝、心肝宝和宁心宝来源于不同的天然虫草菌株经深层发酵所得的菌丝体干燥粉末,其中百令和金水宝分别在1988、1987年获得国家一级新药证书,被《中国药典》作为人工虫草收载的中成药。由人工虫草菌丝体干燥粉末制成的金水宝、百令、心肝宝、宁心宝等胶囊,有与冬虫夏草相似的药理作用,用于治疗心、肝、肺、肾等疾病,被广泛地应用于临床治疗。各品牌的发酵虫草菌粉中主要化合物的种类基本相同,其含量有所差异。百令胶囊的糖醇类、甾醇类和氨基酸类的含量较高,腺苷、尿苷、鸟苷这3种主要的核苷化合物含量最低;宁心宝胶囊中腺苷、尿苷、鸟苷这3种主要的核苷化合物含量最高,糖醇类和甾醇类含量较低;其它两种品牌胶囊的各成分含量差别不明显。从所含化学成分的种类上看,人工虫草与天然虫草并无明显差别。由于各方面因素的变化,天然虫草价格昂贵;而发酵虫草菌粉生产成本低,资源丰富,价格低廉,能满足市场需求。发酵虫草菌粉具有补肺益肾的功能;其资源丰富,价格实惠,在一定程度上缓解了天然虫草供不应求的现状。 研究表明发酵虫草菌粉主要含有核苷类及碱基、氨基酸、甾醇类、多糖等。
1.核苷类化合物
核苷类化合物是发酵虫草菌粉的主要有效成分之一,为水溶性成分,具有提高免疫、抗氧化、抗肿瘤及抗癌的治疗作用,发酵虫草菌粉中的核苷类物质主要有腺苷、尿苷、鸟苷等13种,而虫草素只在来自河北和香港的人工虫草中被发现;腺苷、尿苷和鸟苷为发酵虫草菌粉中主要的核苷类化合物,普遍被作为发酵虫草菌粉质量评价时被测定的目标成分。据文献报道,发酵虫草菌粉中的腺苷、尿苷、鸟苷、腺嘌呤和尿嘧啶的含量都比天然虫草中含量高,肌苷却远低于天然冬虫夏草中的含量。
2.糖醇类化合物
甘露醇是一种风味成分,存在于一般蘑菇的子实体中,是某些虫草菌粉质量控制指标之一。虫草粉中甘露醇的含量为16.58%,甘露醇的含量因虫草的产地而不同,一般在2.9%-8.5%,菌丝中的含量高于子实体中的含量。在4种人工虫草制剂中,百令胶囊中的甘露醇含量最高,但仅为6.83%,心肝宝胶囊次之,宁心宝胶囊最低(仅是百令胶囊的2/5,为2.70%),虽然金水宝胶囊因批号不同,其甘露醇含量有一定的波动,但均高于宁心宝胶囊中的含量。
3.甾醇类
麦角甾醇是真菌生物膜特有的成分,是维生素D2重要的前体物质,具有重要的药用价值。在虫草中,甾醇类以游离和结合的形式存在。在不同虫草中麦角甾醇含量不同,一般为1.0-6.75mg.g-1,游离麦角甾醇含量均明显低于天然虫草中的麦角甾醇含量(天然虫草高达11%,低至3.7%,人工虫草都低于1.5%);不同来源的天然冬虫夏草游离麦角甾醇含量差异显著,因此,其含量应作为虫草重要的质控指标之一。冬虫夏草菌粉中麦角甾醇的含量为1.38 mg.g-1,游离麦角甾醇的含量为0.54mg.g-1。5种发酵虫草菌粉制剂中百令胶囊中麦角甾醇的含量最高,为6.06-6.10 mg.g-1,金水宝胶囊为3.45-3.87mg.g-1,心肝宝胶囊为3.47-4.42mg.g-1,宁心宝胶囊为2.51-3.93mg.g-1,至灵胶囊2.48-4.61 mg.g-1。
4.氨基酸类
氨基酸为机体生长发育过程中必需的营养物质。虫草中的氨基酸非常丰富,是强健滋补作用的物质基础之一。天然虫草与人工虫草均含有17种氨基酸,至少含有7种必需氨基酸,其中含量最高的氨基酸因菌种不同而不同,其中有谷氨酸、脯氨酸含量较高,也有精氨酸、脯氨酸居首位。百令胶囊、金水宝胶囊、心肝宝胶囊和宁心宝胶囊中总氨基酸含量分别为31.27%、25.84%、27.50%和31.97%,明显高于天然虫草子实体和虫体、北虫草子实体;百令胶囊中组氨基酸含量高于金水宝胶囊含量,并首次在百令胶囊及其生产发酵液中检测到羟脯氨酸。
5.多糖类
多糖作为虫草重要的活性物质之一,理应作为发酵虫草菌粉质量控制的测定目标物。研究发现,发酵虫草菌粉中多糖含量高,结构组成差异明显;天然虫草中的多糖结构组成相似,均以大分子组分为主。从虫草发酵菌丝体分离纯化得到中性、酸性两种多糖,相对分子质量分别为2.56×104、9.91×104;分别由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、阿拉伯糖和葡萄糖、甘露糖、半乳糖、半乳糖酸、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖组成,比例为46:36:18:1和30:25:14:4:3:3:1;中性多糖主链含(1→6)糖苷键的高度分支的葡甘露半乳聚糖;酸性多糖分支点主要在3位,两者对顺铂损伤的vero细胞有一定保护作用;另有学者从发酵虫草菌粉中分离纯化得到两个多糖,相对分 子 质 量 为1.3×104、5.0×103,组成分别为鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和甘油、硝酸戊四醇酯,比例为:1:4.46:2.43和1:8.07。
有关发酵虫草菌粉的概述、化学成分、提纯工艺、临床应用是由Chemicalbook的王旭艳编辑整理。(2016-6-16) 一种发酵虫草菌粉提纯工艺,其包括如下步骤:
1. 清洗步骤:
1)用自来水清洗微滤膜和超滤膜,直至清洗液澄清,之后用碱液洗涤, 控制碱液的温度、浓度和碱洗时间,洗涤结束后得到碱洗微滤膜和碱洗超滤膜; 收集碱洗液至碱液收集罐中;
2)将1)得到的碱洗微滤膜和碱洗超滤膜用自来水洗涤,直至洗涤液呈 中性,用酸液洗涤,控制酸液的浓度和洗涤时间,检测酸液通过微滤膜的流速, 当流速高于设定值时,停止酸洗;用纯净水继续洗涤,直至洗涤液呈中性,得 到干净的微滤膜和干净的超滤膜;收集酸洗液至酸液收集罐中;
2. 过滤步骤:
1)将发酵虫草菌粉液引入微滤膜缓冲罐中,经干净的微滤膜过滤, 检测滤液流速,收集滤液至超滤膜缓冲罐中,当滤液流速低于设定的微滤膜流 速时,停止过滤,将发酵虫草菌粉微滤浓缩液收集至干燥罐中;
2)将1)中超滤膜缓冲罐中的滤液经干净的超滤膜过滤,收集滤 液至回收罐中,停止过滤后将发酵虫草菌粉超滤浓缩液收集至干燥罐中;
3)将2)中收集的滤液加入收集的酸洗液,得到酸滤液,混合 10小时后再加入1)中收集的碱洗液进行中和,检测合格后排放;
3. 干燥步骤: 将第2)部得到的干燥罐中浓缩液烘干,检测固体中的水分含量,当水 分含量低于设定的水分值时,停止烘干,冷却得到发酵虫草菌固体;
4. 制粉步骤:将3)得到的发酵虫草菌固体研磨,用标准筛过筛后得到发酵虫草菌粉体。
工艺流程图如下: 工艺流程图
近些年,人工虫草制剂被广泛应用临床上的慢性肾功能不全、早期糖尿病肾病和慢性阻塞性肺疾病。
1.慢性肾功能不全 研究者发现百令胶囊和金水宝胶囊能改善慢性肾功能不全患者的营养不良,能明显改善患者肾小球肾炎尿蛋白等临床相关指标,延缓慢性肾功能不全。百令胶囊还能改善患者血管内皮功能,降低动脉粥样硬化的发生率;金水宝胶囊可以改善慢性肾功能不全患者的微炎症状态、肾性贫血,疗效优于西药,副作用小;心肝宝胶囊联合其他药物对慢性肾衰竭具有一定疗效,能显著降低肾脏内尿蛋白,对肾脏起保护作用。
2.早期糖尿病肾病 研究者通过比较治疗组(服用百令胶囊或金水宝胶囊)和对照组,发现治疗组患者的尿蛋白排泄率、血清肌酐水平明显降低,与对照组相比有显著性差异,对早期糖尿病肾病有良好的治疗作用。发酵虫草菌粉治疗糖尿病肾病具有较好的临床效果,其疗效明显优于缬沙坦治疗,尤其是在改善症状,减少蛋白尿,改善肾功能,改善肾循环,延缓肾功能减退进程等方面发挥作用,最终改善糖尿病肾病或者减慢糖尿病肾病的病情进展,在临床上值得推广应用。
3.慢性阻塞性肺疾病(Chronic Obstructive Pulmonary Disease,COPD) 百令胶囊能改善COPD患者的肺功能,降低患者的血清TNF-α水平,升高FEV1、FEV1%预计值、FEV1/FVC;能明显地降低患者的MDA,升高患者血清SOD、NO,从而有效改善COPD患者氧化/ 抗氧化失衡。百令胶囊适用于稳定期的患者,可以提高患者机体的免疫能力,预防慢阻肺急性发作;也适用于COPD急性加重期的患者,它可以改善患者的Scr、BUN、GFR、24 h尿量,明显缩短少尿总时间、少尿持续时间及尿蛋白恢复正常时间,从而提高患者的生活质量。金水宝胶囊能明显降低慢性阻塞性肺疾病患者的TNF-α、TGF-β1水平,降低炎性反应,影响患者气道重塑,减缓气流受限,提高临床疗效,它还可明显提高患者的免疫球蛋白lgG、lgA、C3、C50,显著改善肺功能。
4.其他临床应用 在临床应用时百令胶囊通过减少排斥反应被应用于抑制肾移植排斥反应,是一种较理想的器官移植免疫抑制剂。通过观察临床上原发性高血压患者,研究者发现百令胶囊可降低患者血液UA、TG水平,提高HDL-C水平,改善患者临床相关指标,有明显治疗效果;据报道百令胶囊还用于治疗精液不液化症、中老年女性尿道综合征和自身免疫性甲状腺疾病。据报道,金水宝胶囊被应用于BPH围手术期,能够改善BPH患者的心、肺、脑等重要器官的功能、降低手术风险、预防减少并发症的发生、加速患者术后的恢复;对急性脑梗塞和哮喘也有治疗作用。金水宝胶囊联合缬沙坦可治疗糖尿病肾病并发勃起功能障碍,联合黄精赞育胶囊(由何首乌、黄精、枸杞子、败酱草等中药提取精制而成)治疗肾虚精亏兼湿热证型弱精子症、少精子症引起的男性不育。心肝宝胶囊还有减轻肝损伤,促使血清复常的作用,尤其是可以降低血清肝纤维化指标水平,达到减轻和抑制肝纤维化形成的作用;能改善慢性缺血缺氧性肺源性心脏病症状,降低复发率,减少药物的副作用。宁心宝胶囊能提高器质性心脏病缓慢型心率失常的心率,降低急性心肌梗死的概率,为一种安全有效的抗心律失常药物。

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