牡丹皮提取物

牡丹皮提取物以毛茛科植物牡丹Paeonia suffruticosa Andr. 的根皮为原料提取的产品。具有镇静，催眠，抗惊厥，镇痛，退热，降低血管通透性，降血压和抑菌作用。牡丹多年生落叶小灌木，高1～1.5米，根茎肥厚。枝短而粗壮。叶互生，通常为2 回3出复叶; 柄长6～10厘米；小叶卵形或广卵形，顶生小叶片通常为3裂，侧生小叶亦有呈掌状3裂者，上面深绿色，无毛，下面略带白色，中脉上疏生白色长毛。花单生于枝端，大形;萼片5，覆瓦状排列，绿色;花瓣5或多数，花丝红色，花药黄色;雌蕊2～5枚，绿色，密生短毛，花柱短，柱头叶状;花盘杯状。果实为2～5个蓇葖的聚生果，卵圆形，绿色，被褐色短毛。生于向阳及土壤肥沃的地方，常栽培于庭园。分布河北、河南、山东、四川、陕西、甘肃等地。全国各地均有栽培。

图1为牡丹 牡丹皮含有多种酚类：牡丹酚，牡丹酚苷，牡丹酚原苷，牡丹酚新苷;还含有多种单萜类成分：芍药苷，氧化芍药苷，苯甲酰芍药苷，苯甲酰氧化芍药苷;此外还有没食子酸，挥发油及植物甾醇。牡丹酚原苷约含5%～6%，挥发油约含0.15%～0.4%。 1.对中枢神经系统作用
牡丹酚腹腔注射，对小鼠自发活动及咖啡因所致的小鼠扭体反应有抑制作用；对鼠尾压痛有止痛作用，本品尚有抗休克、抗戊四唑和菸碱所致的惊厥及退热等中枢抑制作用。
2.消炎作用
牡丹酚0.5克/千克灌胃，对右旋糖酐和醋酸引起的大鼠实验性关节炎及脚肿有抑制和消炎作用，并能降低毛细血管通透性。能防止应激所致小鼠溃疡病。对小鼠、豚鼠离体回肠有较弱的抗乙酰胆碱及抗组织胺作用。甙类部分对炎症的作用是通过抑制血小板聚集所致。还发现对纤溶酶有显著抑制作用。水溶性部分对佐剂关节炎大鼠，不论是预防给药或实验治疗，均有明显的抑制作用。
3.抗微生物作用
煎剂用试管稀释法，1：640对乙型链球菌; 1：320对志贺氏痢疾杆菌、鼠疫杆菌; 1： 640对甲型链球菌; 1：80对金黄色葡萄球菌、白喉杆菌、副伤寒杆菌、霍乱孤菌;1：40对福氏、史氏痢疾杆菌、伤寒杆菌、肺炎球菌有抑制作用。此外对真菌、流感杆菌、卡它球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌亦有抗菌作用。鞣质有抗病毒作用。
4.降压作用
丹皮煎剂去牡丹酚后，煎剂1～3克/千克或牡丹酚80～120毫克/千克静脉注射，对麻醉狗及大鼠均有降压作用。“原发”和肾型高血压犬，用牡丹皮煎剂5克/千克灌胃，连续5日，于第6、7日剂量增加至10克/千克灌胃，连续10日，血压有所下降。
5.抗癌作用
体外试验对人体子宫颈癌细胞培养株系JTC-26有抑制作用，抑制率在90%以上。
6.抗凝及抗血栓作用
体外对人血小板试验，发现牡丹皮水提物及芍药酚均能抑制血小板花生四烯酸产生血栓素A，进而抑制血小板聚集，这是由于抑制从花生四烯酸至前列腺H2 的环氧化酶反应的结果。给健康人每日口服牡丹皮提取物3g，连续7日，血小板聚集力显著降低，血栓素B2产生亦降低。对内毒素所致实验性血栓症，牡丹皮甲醇提取物有抑制作用，可使血小板减少，纤维蛋白溶酶减少，凝血酶原时间延长，FDP量增加。丹皮酚、苯甲酰芍药甙及苯甲酰氧化芍药甙均能抑制血小板凝集。丹皮酚、芍药甙、氧化芍药甙等均有抗调理素作用; 苯甲酰芍药甙有阻断纤维蛋白溶酶原活化及抗纤维蛋白溶酶的作用; 氧化芍药甙、苯甲酰氧化芍药甙、苯甲酰芍药甙对红细胞膜有较强的稳定作用，从而能抑制血栓形成。
7.对脂质代谢的影响
丹皮及其所含的丹皮酚、芍药甙对肾上腺素所致的脂细胞的脂肪分解有抑制作用。丹皮水提物能增加脂肪细胞中葡萄糖生成脂肪，而且明显增加胰岛素所致的葡萄糖生成脂肪。
8.对免疫系统的影响
给小鼠分别灌胃牡丹皮、丹皮酚芍药甙、氧化芍药甙、苯甲酰芍药甙，均能促进静注的碳粒在血中的廓清速度，即使单核巨噬细胞系统功能处于低下状态也有促进作用，显微镜检查见肝中枯氏细胞及脾中巨噬细胞吞噬力增强，芍药甙、氧化芍药甙在体外亦能增强小鼠腹腔巨噬细胞对乳液的吞噬功能。丹皮液给小鼠腹腔注射能使其脾脏溶血后斑数增加，用丹皮酚给小鼠腹腔注射每天25mg/kg，连用6天，能使脾重明显增加，且可对抗考的松、环磷酰胺所致胸腺重量的减轻。丹皮酚在低浓度时(10～15mg/kg)能够显著提高外周血酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)阳性淋巴细胞百分率和白细胞移行抑制因子的释放，从而增强机体细胞免疫功能，并且能够显著改善外周血中性白细胞对金黄色萄萄球菌的吞噬作用，而增加机体非特异性免疫功能。研究认为，丹皮酚雾化吸入对大鼠肺巨噬细胞吞噬率、外周血淋巴细胞酸性α-醋酸萘酶阳性百分率和脾细胞花环形成百分率均比对照组提高，统计学上均有显著意义。表明丹皮酚雾化吸入不但可以提高大鼠肺局部非特异免疫功能，并且还可以提高全身性细胞免疫和体液免疫功能。丹皮酚灌胃200mg/kg，连用5天，可减轻小鼠免疫器官重量。加快碳粒廓清速率，减轻迟发型变态反应并降低脾细胞溶血素抗体水平，对亚适浓度ConA和LPS诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖亦有明显抑制作用。体外用药，50μg/mL亦可明显抑制丝裂原诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖，表明丹皮酚可增强单核巨噬细胞系统的功能和抑制免疫应答。
9.对心血管系统的作用
牡丹皮对麻醉犬心能增加冠脉血流量，减少心输出量，降低左室作功的作用。对实验性心肌缺血有明显保护作用，并且持续时间较长，同时降低心肌耗氧量。牡丹酚对心肌细胞Ca2+代谢紊乱所致心肌损伤有保护作用，并能降低心肌细胞内过氧化脂质含量。丹皮煎剂、去牡丹酚后的煎剂，1.0～3.0g/kg或牡丹酚80～120mg/kg静注，对麻醉犬和大鼠均有降压作用。“原发”和肾性高血压犬，用牡丹皮煎剂5g/kg ig，连续5天，于第6、7天剂量增加至10g/kg，血压明显下降。肾性高血压犬用去牡丹酚后的煎剂10g/kg ig，连续10天，血压下降。用牡丹酚0.5～1.0g/kg给肾型高血压犬和大鼠也出现一定的降压效果。
10.其他作用
丹皮总甙可明显抑制四氯化碳和乙醇引起的小鼠血清SGPT升高和脂质过氧化物的产生，对氧自由基有清除作用。丹皮甲醇提取物在体内对小鼠艾氏腹水癌及在体外对小鼠腹水癌细胞、子宫颈癌细胞均有抑制作用。丹皮酚对小鼠有抗早孕作用，对大鼠有利尿作用。丹皮还有防止应激性胃溃疡、抑制胃液分泌的作用。丹皮所含的水解鞣质有降低血液中尿毒素的作用。 【性状鉴别】
根皮呈筒状或半筒状，有纵剖开的裂缝，两边向内卷曲或稍张开，长5～20cm，直径0.5～1.2cm，厚0.1～0.4cm。外表面灰褐色或紫褐色，有多数横向皮孔及细根痕，栓皮脱落处粉红色。内表面淡棕色或灰黄色，有明显的纵细纹，可见多数发亮的结晶物 (牡丹酚)。质硬而脆，易折断，断面较平坦，粉性，粉白色而微红。气芳香，味微苦而涩。以皮厚、断面色白、粉性足、香气浓、结晶物多者为佳。
【显微鉴别】
粉末 淡红棕色。淀粉粒甚多，单粒类圆形或多角形，直径3～16μm，脐点点状、裂缝状或飞鸟状; 复粒由2～6分粒组成。草酸钙簇晶直径9～45μm，有时含晶细胞连接，簇晶排列成行，或一个细胞含数个簇晶。木栓细胞长方形，壁稍厚，(有的呈连珠状增厚) 粉红色。有时可见草酸钙方晶。
【理化鉴别】
(1)取粉末进行微量升华，升华物在显微镜下观察，可见长柱形结晶或针状及羽状簇晶，于结晶上滴加三氯化铁醇溶液，则结晶溶解而呈暗紫色。
(2)取粉末2g，加乙醚20ml，振摇2min，滤过。取滤液5ml，置水浴上蒸干，放冷，残渣中加硝酸数滴，先显棕黄色，后变鲜绿色 (芍药根皮显黄色)。
(3)取粉末2g，加蒸馏水15ml，加热煮沸，把蒸气导入氯亚胺基2，6-二氯苯醌试剂0.1g与蒸馏水1ml配成的溶液中，2min内溶液呈蓝色 (芍药根皮不显色)。
(4)粉末85%乙醇浸液 (1：10) 点于氧化铝薄层板上，置紫外灯下观察，显蓝绿色荧光(川赤芍根皮显绿色荧光)。同法作乙醚浸液，显蓝绿色荧光 (川赤芍根皮无反应)。
(5)取粉末0.15g，加无水乙醇25ml，振摇数分钟，滤过。取滤液1ml，用无水乙醇稀释至25ml，照分光光度法测定，在274nm波长处有最大吸收。
(6)取粉末1g，加乙醚10ml，密塞，振摇10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮2ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制成5mg/ml的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯 (3：1)展开，喷以盐酸酸性5%三氯化铁乙醇溶液，热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色斑点。
【紫外光谱鉴别】
取样品粉末适量，用无水乙醇浸泡6h，制成含药材2.5mg/ml的溶液，测定其紫外光谱。结果牡丹皮在213、 274nm波长处有最大吸收，而紫斑牡丹皮在213、231、273nm波长处有最大吸收峰。

图2为牡丹皮及其习用品的紫外光谱图
1.牡丹皮 2.紫斑牡丹皮
图3为牡丹皮中丹皮酚的提取
注释：通过实验证实，加氯化钠可以使丹皮酚随水蒸汽蒸馏的速度加快、且提取效率高;对丹皮酚的回收率达99.86%，而不加氯化钠回收率为83.46%。 性味：辛、苦，微寒。归心、肝、肾经。
功效：清热凉血、活血行瘀。
主治：热入血分，发斑、惊痫、吐血、衄血、瘀血阻滞、肠痈腹痛、便血、瘀血痛经、闭经、月经不调、月经过多而挟瘀块，症瘕;跌打损伤之瘀血作痛，骨蒸劳热，皮肤瘙痒，痈肿疮疖，鼻塞或痒等。 血虚有寒，月经过多及孕妇不宜用。