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巴戟天提取物

巴戟天提取物

中文名称:巴戟天提取物
英文名称:Morinda Root Extract

巴戟天提取物 用途与合成方法

巴戟天提取物是一种植物提取物,来源于茜草科植物巴戟天的干燥根,又称为鸡肠风、鸡眼藤、三角藤。纯品为棕色或灰白色粉末,是蒽醌、黄酮类化合物,具有补肾阳,强筋骨,祛风湿之功效。用于阳痿遗精,宫冷不孕,月经不调,少腹冷痛,风湿痹痛,筋骨痿软等症的治疗。存放在阴凉、干燥、避光的地方。
临床研究表明,巴戟天提取物没有显示出任何毒性。在普通剂量下也没有明显的副作用。研究发现一下副作用只会在部分服用剂量超过每天1000mg的病例中出现:易怒,失眠和不快感。
植物巴戟天属于茜草科。全年均可采挖,洗净,除去须根,晒至六、七成干,轻轻捶扁,晒干。根呈扁圆柱形,略弯曲。长度不等,直径为1-2厘米。表面灰黄色或暗灰色,具纵纹及横裂纹,皮部有时横向断离,露出木部,呈串节状。质韧,断面皮部厚,紫色或淡紫色,易与木部剥离,木部黄棕色或黄白色。无臭,味甜而微涩,性微温,在中国传统药材中归肾、肝经。
巴戟天提取物常用于提升男女性功能强度。其用于阳萎,早泄,后背与膝盖疼痛和不育。也同样被妇女使用于治疗不孕和性冷淡。另外,其也被认为对心脏有好处。并且就像其它的滋补类药草,其也显示出可有效降低高血压。因为巴戟天不仅功效强劲而且耐受性极其良好,因而成为最优秀的滋补剂之一。其被认为是一种主要的延寿药草且是道教药学理论中的常用成分。 巴戟天为攀援藤本,攀附它物向上生长,曰“戟天”,原产巴郡,今四川省,是我国四大南药之一。生长于山地疏林下、林边、溪边、山谷或栽培。主产于广东高要、德庆、五华、新丰、广宁、郁南、紫金、开封;广西钦州、上恩、玉林、宁明;福建南清、平和、永定、武平。
【基源】为茜草科植物巴戟天Morinda o fficinalis How的干燥根。
【别名】巴戟、戟天、兔儿肠、鸡肠风、鸡眼藤等。
【植物形态】 缠绕或攀缘藤本。根茎肉质肥厚,圆柱形,支根多呈念珠状,鲜时外皮白色,干时暗褐色,有蜿蜒状紧纹,断面呈紫红色。茎圆柱状,有纵条棱,小枝幼时有褐色粗毛,老时毛脱落后表面粗糙。叶对生,长椭圆形,长3~13cm、宽1.5 ~5cm,先端短渐尖,基部楔形或阔楔形,全缘,下面沿中脉上被短粗毛,叶缘常有稀疏的短睫毛,叶柄有褐色粗毛,托叶鞘状。花序头状,花2~10朵,生于小枝顶端,罕为腋生。花萼倒圆锥状,长3 ~4mm,先端有不规则的齿裂或近平截,花冠肉质,白色,花冠管的喉部收缩,内面密生短毛,通常4深裂,雄蕊4枚,花丝极短,子房下位,4室,花柱2深裂。浆果近球形,直径5~9mm,成熟后红色,顶端有宿存的筒状花萼。花期4~5月,果期9~10月。野生品全年可采挖,以秋冬季采收为好。栽培品须5~7年采收,如追肥管理好,2~3年亦可采收。
巴戟天
图1为巴戟天 从巴戟天根部的提取物中已经分离得到的成分有:甲基异茜草素(Methylisoalizarin),甲基异茜素1-甲醚,蒽醌化合物及β-谷甾醇,大黄素甲醚,2-OH-3-CH2OH蒽醌,棕酸及十九烷。后又分离得到水晶兰甙,四乙酰基叶蒂甙,2-甲基蒽醌,24-乙基胆甾醇及铁、锰、锌等多种元素。尚含有黄酮甾体、三萜类、氨基酸、有机酸及强心甙等。本信息是由Chemicalbook的李琳娜编辑整理。
1.萘醌化合物
萘醌化合物是巴戟天中的主要有效成分。目前从巴戟天根中已分离得到多种萘醌类化合物, 分别为: 甲基异茜草素、甲基异茜草素-1-甲醚、1-羟基萘醌、1-羟基-2-甲基萘醌、1,6-二羟基-2,4-二甲氧基萘醌、大黄素甲醚、2-羟基-2-甲氧基萘醌、2-甲基萘醌等。还分离出:2-羟基-1-甲氧基萘醌、1,3-二羟基-2-甲氧基萘醌、1-羟基-2,3-二甲基萘醌、1-羟基-3-甲氧基萘醌。
2.环烯醚萜苷类
主要有水晶兰甙、四乙酰车叶草苷、车叶草苷酸、去乙酰车叶草苷酸、环烯醚萜内酯及环烯醚萜苷。
3.有机酸类
主要有棕榈酸、琥珀酸。
4.低聚糖类
巴戟天寡糖(MOO)是巴戟天醇提物水溶性部分中的主要有效成分,主要有耐斯糖、1F-果呋喃糖基耐斯糖、菊淀粉系列的六聚糖和七聚糖。
5.多糖
有MOHP-Ⅰ,MOHP-Ⅱ,MOHP-Ⅲ和MOHP-Ⅳ四个组分。MOHP-Ⅰ的单糖组成为葡萄糖和果糖,分子质量约为2ku,呋喃糖环结构;MOHP-Ⅲ是一种均一的糖蛋白物质,其组成单糖为阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、果糖以及半乳糖,分子质量约为35ku。
有研究对离子交换层析得到的一种多糖的化学结构进行分析,表明该多糖组分的分子量为 36061,是一种由阿拉伯糖、半乳糖和葡萄糖组成的杂多糖以α-1,3-吡喃葡萄糖和α-1,4-吡喃半乳糖为主链,平均每5个葡萄糖连接一个半乳糖,每个重复单元具有一个支链, 支链由3个呋喃阿拉伯糖以α-1,3-键组成,连接在主链葡萄糖的6位碳上,MOPI-Ⅲ含有乙酰基,连接在主链半乳糖的2碳原子上。
6.氨基酸
巴戟天根的水溶性部分分离得到总氨基酸。其中含 11 种游离氨基酸和 17 种水解氨基酸。其中亮氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、缬氨酸及胱氨酸 7 种氨基酸为人体必需氨基酸。
7.微量元素
中药巴戟天根皮中24种无机元素的含量, 其中含铁、锰、铜、锌、铬、锡、镍、钼、钴、钒、锶等11种人体必需微量元素。
8.其它成分
龙脑、十六酸、十六酸乙酯、顺-9-十八烯酸、十九烷、β-谷甾醇、24-乙基胆甾醇(单糖混合物)。另外,巴戟天根皮的正丁醇提取部分得到一水溶性环丙酮类衍生物,被命名为Offieinalisin。
水晶兰苷(Monotropein):
分子式C16H22O11,分子量390.34。一水合物,无色针状或柱状结晶(水),mp.170℃~173℃(分解),[α]D20-129.2°(C=1.00,水)。溶于水和乙醇,几乎不溶于醋酸乙酯。
甲基异茜草素(Rubiadin):
橙红色针晶,分子式C15H10O4,分子量253.984。
结构式
图2为结构式 1.对下丘脑-垂体-性腺轴功能的影响
有报道巴戟天水煎剂对正常雄性大鼠血中黄体生成素(LH)水平没有明显影响,但却使垂体前叶、卵巢和子宫的重量明显增加。特别是它能提高卵巢HCG/LH受体功能。巴戟天能使去卵巢大白鼠垂体对注射黄体生成素释放激素 (LRH)后LH分泌反应明显增加。巴戟天可能不是直接刺激垂体促黄体激素的分泌而是提高垂体对LRH的反应性及卵巢对LH的反应性来增强下丘脑-垂体-卵巢促黄体功能。
2.抗炎镇痛
巴戟天乙醇提取物具有一定的抗类风湿性关节炎作用,其抗炎镇痛作用和降低炎症介质 PGE2含量密切相关。巴戟天醇提物、乙酸乙酯部位、正丁醇部位对LPS刺激的RAW264.7 巨噬细胞产生的NO含量有显著的抑制作用,表明巴戟天可能通过抑制NO的产生发挥抗炎作用。巴戟天水提取物具有油脂抗氧化作用,并且随着添加量的增加抗氧化效果越好。巴戟天水提取物对细菌的抗菌效果较好,尤其是对金黄色葡萄球菌的抗菌能力强,但对于酵母和霉菌的抑制作用弱。巴戟天正丁醇提取物对缺氧/复氧损伤的心肌细胞有防护作用,其防护作用可能与降低 TNF-α、IL-1β、IL-6的含量有关。巴戟天中的水晶兰营具有抗炎镇痛作用,由热板实验和角叉菜胶诱导的扭体镇痛实验表明,水晶兰普溶液给小鼠灌胃,能明显缩短小鼠疼痛反应的时间;另外,水晶兰普还能显著地消除由角叉菜胶诱导的大鼠脚趾浮肿。
3.对甲状腺功能低下动物模型的影响
巴戟天水煎液口服能增加甲状腺功能低下(甲基硫氧嘧啶造型的甲减)小鼠的耗氧量,使甲减小鼠大脑中升高的M受体最大结合容量恢复正常。巴戟滋补膏 (巴戟天为主药)对甲低阳虚兔血中cGMP的异常升高有纠正作用,对兔血清T3水平有稳定作用,并使甲低阳虚兔肝、胰、脾结构形态异常有所减轻,肝中RNA和糖元含量与正常对照兔相近。
4.增重及抗疲劳作用
口服巴戟天水煎液20g/kg·d,连续11天,能显著增加小白鼠体重,延长持续游泳时间。
5.对血液系统的影响
口服巴戟天水煎液能升高幼鼠血中白细胞数,对由于γ射线照射引起的小鼠血中白细胞下降有升白作用。巴戟天中部分蒽醌类化合物对L1210白血病的生长有抑制活性。巴戟天还有促进小鼠粒系祖细胞的生长之功效。
6.免疫促进作用
巴戟天低聚糖类成分有促进细胞免疫的作用,巴戟天水溶性低聚糖单体混合成分12.5~50mg/kg,对小鼠胸腺T淋巴细胞增殖反应有明显的促进作用,对脾淋巴细胞增殖反应的作用有待继续研究。低聚糖类成分在免疫药理学中为值得探索的新领域。口服巴戟天水煎液能抑制幼年小鼠胸腺萎缩。
7.抗抑郁作用
巴戟天水煎膏能显著改善利血平化小鼠的诸体征及其脑内单胺递质水平。经各种抑郁模型筛选,发现巴戟天水溶性提取物以及分离出的5个单体 (琥珀酸以及耐斯糖等4个菊淀粉型低糖单体)均有显著的抗抑郁活性。在小鼠悬尾实验中,琥珀酸10mg/ kg有与阳性对照药地昔帕明 (dispramine) 10mg/kg同等程度的抗抑郁活性,在相同实验中低聚糖单体的抗抑郁最有小剂量在62.5~125μg/kg范围以内,能在不影响小鼠自发活动的剂量下有明显的抗抑郁作用,并证实其机理主要是通过5-羟色胺(5-HT)这种递质而实现的。
8.皮质酮分泌促进作用
临床研究表明巴戟天可减轻肾炎、全身性红斑狼疮患者长期使用类固醇的副作用,并使类固醇易于停药。巴戟天热水提取物(1g/kg)小鼠经口给药,可见糖皮质激素标记酶肝ATP活性显著上升,巴戟天提取物具有增加血中皮质酮含量的作用,其活性可能是由于下垂体-肾上腺皮质系统受到刺激作用所致。巴戟天湿浸剂 (每天5~25g/ kg) 口服对去肾上腺幼年大白鼠的存活时间无延长作用,亦无增加肾上腺饥饿小白鼠肝糖元累积量的作用,认为巴戟天可使幼鼠胸腺萎缩,抑制大鼠塑料环肉芽肿,似有促肾上腺皮质激素样作用。
9.增强记忆
巴戟甲素可以通过降低脑耗氧量使急性脑缺血损伤小鼠的断头后喘气时间延长,改善能量代谢而提高小鼠急性缺血缺氧的耐受能力,其还可以降低脑缺血再灌注大鼠海马CAI区锥体细胞缺血时和再灌注30min时细胞内钙离子浓度,来改善脑缺血再灌注损伤。巴戟素对大鼠脑缺氧损伤有保护作用,并能增强大鼠的记忆功能,其作用机理与其对抗自由基生成,增加能源供应或对抗NO的毒性作用等有关。可明显改善衰老大鼠空间学习记忆力下降,尤以空间探索过程为突出,巴戟素对海马突触长时程增强(LTP)的增强效应可能是促学习记忆作用的突触机制之一。
10.促进骨生长
巴戟天水提物与巴戟天多糖均能显著促进体外培养成骨细胞增殖、促进成骨细胞分泌碱性磷酸酶与骨钙素、促进成骨细胞转化生长因子β1 mRNA 的表达, 并且巴戟天多糖优于巴戟天水提物。
11.抗癌作用
巴戟天所含的蒽醌类成分有抗致癌促进剂的作用,其氯仿提取物的粗结晶对L1210白血病细胞生长有抑制活性的作用。巴戟天水提液可降低荷瘤小鼠的红细胞C3b受体花环率,升高红细胞免疫复合物花环率,提高荷瘤小鼠血清IL-2,外周血T淋巴细胞CD4+下降,CD8+升高。巴戟天水提液可明显抑制小鼠HepA肿瘤生长,推测其作用是通过调控机体的免疫机能,激活淋巴细胞和各种抗癌因子活性达到抗癌目的。
12.其他作用
小鼠连续6天灌服巴戟45%乙醇渗提物15g/kg,停药24小时后,使戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠时间显著缩短,肝重增加;但肝匀浆细胞色素P450含量无明显变化。巴戟天水煎剂经大肠杆菌体外SOS比色分析亦未见致诱变作用。巴戟天所含成分(蒽醌类化合物) 有抗致癌促进剂作用 (EB病毒活性抑制效果)。 以水、乙醇、乙酸乙酯、石油醚为溶剂采用常规浸提法提取巴戟天样品,发现水提物,醇提物得率较高。以水为溶剂适合的提取条件为:提取温度60℃、料液比 1:30、提取时间 1.5h、单次提取。以乙醇为溶剂适合的提取条件为:提取温度60℃、料液比 1:30、提取时间 1.5h、两次提取。
1.多糖的提取
巴戟天多糖的提取方法有很多,例如水提取、酸提取、碱提取、酶解提取、超声提取等。用酸或碱提取巴戟天粗多糖的提取率比蒸馏水提取的大,但其多糖含量却都不如用蒸馏水提取的高。另外碱提取巴戟天多糖,其提取液高度粘稠,很难过滤,而且其最终粗提物也有变色情况出现,变为棕黄色。与酸碱提取相比,水提取作用温和,成本相对,因此水是较理想的提取溶剂。应用酶法或超声波等方法辅助提取多糖,可以提高得率。实验证明,纤维素酶能够显著提高巴戟天多糖的提取率,适宜的提取工艺条件为温度55℃,pH5.0,酶用量0.5%,提取时间2h,此条件下多糖提取率为8.56%,为热水浸提法多糖提取率的1.91倍。
2.主要环烯醚萜苷的提取
取生巴戟天700g,置圆底烧瓶中,加入10倍量50%乙醇回流提取3次,合并提取液,减压回收乙醇,浓缩液通过大孔吸附树脂柱,收集上样流出液,水洗脱,收集水洗脱液,合并流出液和水洗液,减压浓缩,浓缩液备用;方法一:浓缩液经粉末活性碳吸附后,依次用水、20%乙醇和70%乙醇洗脱,收集70%乙醇洗脱液,浓缩,放置析出结晶,经甲醇重结晶得化合物1,析晶后的药液经反复反相硅胶C18柱层析(中低压快速制备色谱)分离分得粗制的化合物2,粗制的化合物2经甲醇—丙酮重结晶后得到化合物2;方法二:部分浓缩液,经减压回收溶剂,得粘稠状浸膏,甲醇溶解,与硅胶拌样,经硅胶柱吸附,依次用乙酸乙酯—甲醇洗脱剂系统冲洗,分别收集乙酸乙酷:甲醇(5:1)和乙酸乙醋:甲醇(3:l)部分。 总蒽醌提取工艺
图3为总蒽醌提取工艺
总氨基酸提取工艺
图4为总氨基酸提取工艺
总多糖提取工艺
图5为总多糖提取工艺 性状鉴别
根呈扁圆柱形,稍弯曲,长10~14cm,直径0.7~1.5cm,表面灰黄或黄棕色,有不规则皱纹,皮部有时横向断裂露出木心,形似连珠。质硬,肉厚易剥落,断面皮部约0.5~0.7cm,紫色或淡紫色; 木部较小,约0.2~0.4cm,黄棕色或黄白色,齿轮状。气微,味甘微涩。以条粗壮,连珠状,肉厚,色紫者为佳。
显微鉴别
粉末 淡紫色。①木栓细胞淡棕色,常与石细胞或含晶细胞相连。②石细胞较多,单个散在或数个成群,类方形,类圆形、多角形或不规则状,纹孔及孔沟明显,有时可见层纹。③纤维管胞长梭形,具缘纹孔较大,纹孔口成人字形、十字形或斜缝状。④草酸钙针晶束纤细,参差不齐,存在于薄壁细胞中,针晶长至180μm 。
紫外光谱鉴别
巴戟天的紫外光谱
取样品粗粉0.2g,加乙醇20ml,放置12h,过滤,滤液测定其紫外光谱。测试条件:扫描范围200~400nm,吸收度量程0~2A,狭缝宽度2nm,尺度扩张40nm/cm。结果巴戟天在320± 2、233±2nm波长处有最大吸收,在270±2nm波长处有肩峰。 小鼠单次口服巴戟天寡糖22. 62 g·kg-1或大鼠口服15.08 g·kg -1均无致死作用,也未见明显不良反应,上述剂量分别相当于相应小鼠或大鼠口服最佳药效学剂量的452.4和603.2倍。大鼠单次腹腔注射巴戟天寡糖14.28 g·kg-1,给药后动物活动正常,观察一周无异常发现,体重增长正常,未有致死现象。此剂量相当于大鼠最佳口服有效剂量的571.2倍。 甘、辛,微温。有补肾阳,强筋骨,祛风湿功效。用于阳痿遗精,宫冷不孕,月经不调,少腹冷痛,风湿痹痛,筋骨痿软。

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