细胞复苏 细胞传代 细胞冻存

JeKo-1

JeKo-1,,结构式
JeKo-1
  • CAS号:
  • 英文名:JeKo-1
  • 中文名:JeKo-1
  • CBNumber:CB55738730
  • 分子式:
  • 分子量:0
  • MOL File:Mol file

JeKo-1性质、用途与生产工艺

  • 细胞复苏 复苏JeKo-1细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
  • 细胞传代

    JeKo-1细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

    a)、对于JeKo-1细胞,传代可参考以下方法:

    1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗JeKo-1细胞1-2次。

    2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。

    3.轻轻吹打JeKo-1细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

    4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将JeKo-1细胞悬液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。

  • 细胞冻存

    1、JeKo-1细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;

    2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待JeKo-1细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;

    3、用适量的冻存液重悬JeKo-1细胞,并放置于冻存管中;

    4、先将JeKo-1细胞冻存管放置于-20℃1.5h,然后将其移入-80℃。

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